计数培养基适用性检查

计数培养基适用性检查
1、一般要求
 
2、胰酪大豆胨琼脂（TSA）
无菌性检查：取已灭菌TSA注皿，于30-35℃培养3天，应无菌落生长。
试验用菌种：金葡、铜绿、枯草、白念、黑曲
接种方法：
涂布法：分别接种不大于100cfu试验用菌悬液于TSA平板表面；
倾注法：分别接种不大于100cfu试验用菌悬液于无菌平皿中，倾注约15ml该培养基，轻轻摇匀。
适用性检查：枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌于30-35℃培养不超过3天；白色念珠菌、黑曲霉于30-35℃培养不超过5天。
判断标准：与对照培养基比较，菌落平均数比值在0.5-2（50%-200%）范围内，且菌落形态大小一致。
3、胰酪大豆胨液体（TSB）
无菌性检查：取已灭菌的TSB，于30-35℃培养不少于3天，培养基应澄清。
试验用菌种：金葡、铜绿、枯草
接种方法：
涂布法：分别接种试验用菌悬液于该培养基中，接种量不大于100cfu，摇匀，培养。
适用性检查：30-35℃培养不超过3天。
判断标准：金葡、铜绿、枯草接种后，与对照培养基比较，试验菌生长良好。
备注：该培养基同时用于稀释液的制备和控制菌检查时，需考虑同时满足计数和控制菌检查培养基适用性检查控制要求。
4、沙氏葡萄糖琼脂（SDA）
无菌性检查：取已灭菌的SDA注皿,于20-25℃培养5天,应无菌落生长。
试验用菌种：白色念珠菌、黑曲霉
接种方法：
涂布法:分别接种不大于100cfu允试验用菌悬液于该平板表面
倾注法:接种大于1cfu试验用菌悬液于无菌平皿中,倾注约15ml该培养基,轻轻摇匀。
适用性检查：白色念珠菌、黑曲霉于20-25℃培养不大于5天
判断标准：与对照培养基比较菌落平均数比值在0.5-2(50%一200%)范围且菌落大小、形态一致。
备注:如该培养基用于控制菌白色念珠菌的检查时,同时需要满足捌菌项下培养基适用性检查要求。
5、沙氏葡萄糖琼脂+抗生素
无菌性检查：取已灭菌的SDA注皿,于20-25℃培养5天,应无菌落生长。
试验用菌种：
抑菌性检查：枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌
促生长能力：白色念珠菌、黑曲霉 。
常用抗生素：
1、庆大霉素：广谱。对G-，G+菌有较好的抗菌作用。
2、氯霉素：广谱。对G-菌作用强；对G+菌作用不及青霉素与四环素。
接种方法：
抑菌性：接种枯草、金葡、铜绿菌悬液不少于100cfu。
促生长能力：接种白色念珠菌、黑曲霉菌悬液不大于100cfu。
适用性检查：
白色念珠菌、黑曲霉于20-25℃培养不大于5天。
与对照培养基比较，菌落平均数比值在0.5-2范围内。
判断标准：枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌不得生长。