甲磺酸乙酯（EMS）细胞突变诱导试剂盒产品说明书

甲磺酸乙酯（EMS）细胞突变诱导试剂盒产品说明书
甲磺酸乙酯（EMS）细胞突变诱导试剂是一种旨在使用烷化剂甲磺酸乙酯诱导细胞发生变异而产生HPRT或TK基因功能缺失的突变株，成为筛选应用标记细胞的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于动物细胞和人体细胞。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，突变频率高。
 
技术背景
 
甲磺酸乙酯（ethyl methanesulfonate，EMS）是一种化学诱变致畸的烷化剂（alkylating agent）。它将导致细胞次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase；HPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（thymidine kinase，TK）基因座发生位点突变，而引起基因功能缺失。由此采用6-硫氢基鸟粪嘌呤（6-thioguanine；6-TG）和5-溴脱氧尿嘧啶（5-Bromodeoxyuridine；BudR）分别筛选TK和HPRT缺失型细胞，因为6-TG是的结构替代物，而BUdR是THYMIDINE的结构类似物，当TK和HPRT正常的情况下，它们将利用6-TG和BUdR进行DNA复制而使细胞死亡，反之，它们无法利用，细胞则继续生存。这是负向选择。但是正常的细胞（例如正常人体细胞，其X染色体的长臂上带有此基因）能在氨基嘌呤胸苷（hypoxanthine/aminopterin/thymidine；HAT）培养基中生长，这是正向选择。