植物组织可溶性胞浆蛋白粗提制备试剂盒产品说明书（中文版）
主要用途
YIJI植物组织可溶性胞浆蛋白粗提制备试剂是一种旨在使用物理和化学方法快速充分裂解组织，并在蛋白酶抑制混合剂的帮助下，然后通过差速离心，收集所有细胞浆内可溶性蛋白质的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种新鲜植物组织，包括叶片（leaf）、谷粒（grain）、种子（seed）等样品。可直接用于后续一维或二维蛋白电泳（SDS-PAGE）、西方杂交（Westernblotting）、亲和层析纯化（affinity chromotagraphy）、免疫沉淀（immunoprecipitation）、酶活性分析（enzymatic activity analysis）、蛋白质相互作用分析（protein-protein interaction）、特异性表达识别（specific expression identification）和质谱分析等。产品即到即用，性能稳定，操作便捷，收集效果好。
技术背景
通过特殊裂解液和蛋白酶抑制混合剂可以防止裂解后细胞核内各种活性蛋白成分遭到活化的内源性蛋白酶
的破坏，充分保留细胞核内蛋白质的免疫和生物学活性。
产品内容
YIJI清理液（Reagent A） 毫升
YIJI裂解液（Reagent B） 毫升
YIJI活性液（Reagent C） 微升
产品说明书 1 份
保存方式
保存YIJI清理液（Reagent A）在 4℃冰箱里，其余的保存在－20℃冰箱里，有效保证 6 月
用户自备
液氮管：用于组织冻存处理
15 毫升锥形离心管：用于组织收集后离心
1.5 毫升离心管：用于样品操作
60 微米尼龙网（NYLON MESH）：用于去除植物组织残渣
4℃台式离心机：用于组织收集和去除杂质
4℃微型台式离心机：用于收集蛋白
DOUNCE 匀浆器：用于组织裂解
实验步骤
实验开始前，将试剂盒里的试剂从－20℃的冰箱里取出，放进冰槽里冻融。然后进行下列操作。
1. 准备好植物组织，例如叶片、种子等，并秤重 200 毫克
2. （选择步骤）放进预冷的 15 毫升锥形离心管
3. （选择步骤）加入 xx 毫升 YIJI清理液（Reagent A）清洗
4. （选择步骤）抽去清理液
5. 移入到一个液氮冻存管
6. 即刻放进液氮罐过夜
7. 次日从液氮罐里取出，即刻（最快速度）用研磨棒碾碎组织成粉末状（注意：切莫使组织冻融）
8. 放进一个新的预冷的 15 毫升锥形离心管
9. 加入 xx 毫升预冷的 YIJI裂解液（Reagent B）
10. 加入 xx 微升 YIJI活性液（Reagent D）
11. 强力涡旋震荡 30 秒，充分混匀
12. 即刻放进预冷的 DOUNCE 匀浆器，在冰槽里用匀浆棒匀化组织（约 80 下）
13. 将所有组织匀浆物放在 60 微米尼龙网（NYLON MESH）上过滤——此步骤去除组织残渣
14. 小心移取去渣液到新的 1.5 毫升离心管
15. 即刻放进 4℃微型台式离心机离心 5 分钟，速度为 3000g
16. 小心移取上清液到新的 1.5 毫升离心管
17. （选择步骤）即刻放进 4℃微型台式离心机离心 5 分钟，速度为 20000g
18. （选择步骤）小心移取上清液到新的 1.5 毫升离心管——此步骤为初级胞浆蛋白
19. 即刻放进 4℃微型台式离心机离心 5 分钟，速度为 100000g
20. 小心移取上清液到新的 1.5 毫升离心管——此步骤为纯化胞浆蛋白
21. 移取 10 微升进行蛋白定量检测（建议使用 YIJIBradford 蛋白质浓度定量试剂盒－YJ30030.1）
22. 放进－70℃的冰箱里备用
23. 或放进冰槽里，继续后续操作
注意事项
1． 本产品为 20 次操作
2． 所有操作均须在 4℃状态下进行
3． 操作时须戴手套
4． 建议一次操作的组织重量在 10 至 250 毫克
5． 建议使用新鲜或冰冻保护良好的植物组织
6． 如果组织含有高浓度的多糖和多酚，建议使用 YIJI多糖/多酚植物组织蛋白制备预处理试剂盒－
YJ30089
7． 碾碎组织步骤：可以将液氮处理的组织放进 15 毫升锥形离心管，然后用针筒挤压塞研磨
8． 1 克组织通常可以获得 20 毫克可溶性胞浆蛋白
9． 如果放在－70℃冰箱里储存备用，避免反复冻融
10．本公司提供系列植物组织细胞分析试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定无蛋白酶污染
