非损伤微测技术（NMT）与激光共聚焦技术的比较

NMT和激光共聚焦技术的比较

什么是激光共聚焦

激光扫描共聚焦荧光显微镜（laser scanning confocal microscopy, LSCM）是一种利用计算机、激光和图像处理技术获得生物样品三维数据、目前最先进的分子细胞生物学的分析仪器。                   

主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子的生物学变化，定量分析，以及实时定量测定等。其不仅可以得到非常清晰的荧光图像，进行多重荧光标记的定位和定量分析，还具有图像三维重建、荧光共振能量转移谱测定，甚至膜电位测定等功能，成为生命科学研究的重要技术手段。

激光共聚焦的局限

随着激光共聚焦技术应用范围的扩大，其在研究中的局限性也逐渐突显。

激光共聚焦技术主要采集的是生物样品内部的离子分子信息，这些离子分子信息的改变既可能源于样品内部离子/分子源的变化，也可能源于样品内外的离子/分子交换。这两种离子/分子变化过程是由完全不同的生命机制引发的。

这要求研究者必须通过其它实验结果，才能得出相对准确的结论。若单纯用激光共聚焦数据作为检测或诊断标准，往往面临较大的假阳性风险。

NMT对比激光共聚焦

共同点

• 实时

• 动态

• 数据可视化

• 测定游离的离子

差异

激光共聚焦技术	非损伤微测技术
使用染料和激光光源	使用电极或者传感器
需要标记	无需标记
荧光易发生淬灭	电极或者传感器稳定
测量时间短	测量时间可短，可长
半活体（有损伤）	近似活体或者完全活体（测定无损伤）
检测内部的离子浓度变化	检测跨膜的离子流速以及外部的离子浓度
测定种类较少，依赖于染料	测定种类多，可测Na+，K+，NO3-，O2等
测量材料不能太大，以细胞为主	测量材料不限，从细胞到整体都可以测量
只能同时测定一种离子	可以同时测定两种离子

 

NMT可测样品种类繁多

 

NMT可以同时测定两种离子

结合

将激光共聚焦技术与非损伤微测技术(NMT)的结合，可以克服单纯用激光共聚焦数据作为检测或诊断标准面临较大的假阳性风险，实现全面获得被测样品内外的离子/分子流动信息。实现内外兼测。