牛睾酮(T)ELISA试剂盒使用说明书
牛睾酮(T)ELISA试剂盒
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人内脂素（Visfatin）的含量。
有效期：6个月
保存条件：2-8℃
牛睾酮(T)ELISA试剂盒实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被牛睾酮(T)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的牛睾酮(T)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
牛睾酮(T)ELISA试剂盒样本处理及要求
1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
试剂盒组成
|
名称 |
96孔配置 |
48孔配置 |
备注 |
|
微孔酶标板 |
8孔×12条 |
8孔×6条 |
无 |
|
标准品 |
0.3mL*6管 |
0.3mL*6管 |
无 |
|
样本稀释液 |
6mL |
3mL |
无 |
|
检测抗体-HRP |
10mL |
5mL |
无 |
|
20×洗涤缓冲液 |
25mL |
15mL |
按说明书进行稀释 |
|
底物A |
6mL |
3mL |
无 |
|
底物B |
6mL |
3mL |
无 |
|
终止液 |
6mL |
3mL |
无 |
|
封板膜 |
2张 |
2张 |
无 |
|
说明书 |
1份 |
1份 |
无 |
|
自封袋 |
1个 |
1个 |
无 |
备注：
1. 标准品浓度依次为：120、60、30、15、7.5、0 ng/mL
2. 经过大量正常标本检验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内，实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过最大标准品浓度时，可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。
注意事项
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
10. 如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
试剂准备
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
实验结果计算
以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。
试剂盒性能
1. 检测范围：3.75 ng/mL – 120 ng/mL。
2. 灵敏度：最低检测浓度小于0.1 ng/mL。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。
牛睾酮(T)ELISA试剂盒相关产品推荐：
小鼠胃泌素(Gas)ELISA试剂盒
人钙卫蛋白(CALP)ELISA试剂盒
人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA试剂盒
兔单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)ELISA试剂盒
人毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M2抗体(M-AChRM2)ELISA试剂盒
大鼠Na-K-ATP酶(Na-K-ATPase)elisa试剂盒
人维生素B2（VB2）elisa试剂盒
小鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒
鸡α胞衬蛋白(SPTAN1)ELISA试剂盒
大鼠亚硝酸盐(NO3)ELISA试剂盒
小鼠毒性休克综合征毒素1(TSST-1)ELISA试剂盒
鱼白介素1β(IL1β)ELISA试剂盒
兔氨基端前脑钠素(NTProBNP)ELISA试剂盒
猪白介素16(IL16)ELISA试剂盒
人组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒
人转甲状腺素蛋白(TTR)ELISA试剂盒
小鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒
兔Klotho蛋白(Klotho)ELISA试剂盒
牛锁链素(DES)ELISA试剂盒
人异质性胞核核糖核蛋白G(hnRNPG)ELISA试剂盒
人垂体腺苷酸环化酶激活肽38(PACAP38)ELISA试剂盒
硝基咪唑类ELISA检测试剂盒(定性)
人血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA试剂盒
人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒
小鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒
小鼠二酰基甘油(DAG)ELISA试剂盒
大鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒
人激肽释放酶8(KLK8)ELISA试剂盒
牛睾酮(T)ELISA试剂盒针对国内酶联免疫行业不同的需求，我们上海科顺生物科技有限公司特推出科研型elisa试剂盒、商用型ELISA试剂盒，我们均采用环保型包装材料，响应了国家节能减排的要求，同时，为了更好的适应客户需求，我们推出经济型ELISA试剂盒，让大家的实验更节省，公司在不断努力降低ELISA试剂原料成本，以便更好的节省ELISA试剂盒整体价格，相信不远的将来，ELISA试剂盒价格会更便宜，实验效果会更稳定！
