【锐赛小课堂】miRNA研究之RNA提取试剂的选择

 RNA提取试剂的选择

RNA提取对于科研人员来说并不陌生，但是要得到好的结果却不是一件很容易的事情。事实上，现在市面上的丰富的RNA提取试剂基本上可以满足科研人员的需要，为什么往往提取的RNA却容易失败呢？

RNA提取失败的主要现象有三个：提取的RNA降解、提取的RNA量偏低以及提取的RNA纯度低。究竟怎样才能确保RNA提取的成功率呢？

首先，要确定材料的可用性。尽管现有的RNA提取试剂都用抑制RNase的成分，但提取的材料仍需谨慎处理。提取的材料的新鲜度是获取完整RNA的关键，但是由于种种原因无法立即从新鲜材料中提取RNA时，使用Takara公司的样品保护剂 Sample Protector for RNA/DNA可以免去使用液氮或超低温冰箱的不便，同时也可以有效解决组织、细胞样品的短时间保存及运输问题。此外，如果将不同时期收集的样品都预先存放于本试剂中，可以做到立即终止并固定RNA表达的时序变化，减少实验组间的误差。

其次，选择合适的提取试剂是最重要的一步。好的提取试剂在确保成功的同时，操作方便且经济实用。对于动物组织、简单的植物材料、各种微生物、培养细胞的total RNA提取，Takara公司的RNAiso Plus具有诸多的成功案例。随着2013年7月柱型提取试剂TaKaRa MiniBEST Universal Total RNA Extraction Kit的成功上市，进一步丰富了Takara RNA提取的产品线。该产品采用了独特的细胞裂解系统，无需苯酚氯仿抽提等步骤，简单快捷。组织或细胞裂解后，提取操作仅需20分钟便可完成。

对于富含多糖多酚的植物类组织提取是个难点，Takara精心研发的柱型提取试剂TaKaRa MiniBEST PlantRNA Extraction Kit可以轻松解决这个问题。TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extraction Kit可以高效地从各种简单的植物组织材料（叶片、茎、幼苗等）、富含多糖多酚的植物组织材料（果实、种子等）、真菌提取高纯度的TotalRNA，适用范围广泛。按照标准流程，本试剂盒可以有效地提取分子量大于200 nt的RNA，也可以按照可选步骤提取得到包含Small RNA(<200 nt)的Total RNA。试剂盒中包含了RNA提取所需的全部试剂，无需额外购买其它试剂。

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