黄曲霉毒素偶联抗原(完全抗原、酶标抗原)合成方法技术

    黄曲霉毒素在自然界分布的黄曲霉中，约有 20%的菌株能产生黄曲霉毒素。其中花生、玉米、黄豆及棉籽等作物与其副产品易感染黄曲霉毒素，含黄曲霉毒素量较多，食入后在动物体内主要存在于如肝脏、尿与粪便中。黄曲霉毒素是一种肝脏毒素，能引起肝细胞变质、坏死、出血；目前，黄曲霉毒素的酶联免疫法，免疫胶体金法等检测方法均需要黄曲霉毒素抗原抗体。
（1）黄曲霉毒素半抗原合成（合成技术路线见下图）
 20-100mg黄曲霉毒素溶于丙酮中，10%硫酸中，于60℃搅拌反应，3h后，蒸干丙酮，用氯仿洗涤4次，蒸干后得到黄曲霉毒素半抗原。

（2）黄曲霉毒素全抗原（人工抗原、完全抗原、酶标抗原）合成
将黄曲霉毒素半抗原与牛血清白蛋白偶联得到免疫抗原。
取60mg牛血清白蛋白溶于9.5ml PBS（0.01mol/L,pH5.0）溶液中，加入50微升硼氢化钠, 室温搅拌1h，用0.01mol/LPBS透析3天，每天换3次透析液，得到黄曲霉毒素与牛血清白蛋白的免疫抗原。