呕吐毒素偶联抗原(完全抗原)合成方法技术

         呕吐毒素偶联抗原(完全抗原)合成方法技术
　　　呕吐毒素其产毒菌主要是镰刀菌属(Fusarium)的菌侏，其主要污染玉米、小麦、大米、大麦、小米和燕麦等谷物。呕吐毒素具有雌激素作用，主要作用于生殖系统，可使家畜，家禽等产生雌性激素亢进症。食用含呕吐毒素的面粉制作的各种面食也可引起中枢神经系统的中毒症状，如恶心、发冷、头痛、神智抑郁和共济失调等。妊娠期的动物(包括人)食用含呕吐毒素的食物可引起流产、死胎和畸胎，因此建立快速、灵敏、准确的呕吐毒素检测技术对人类健康具有重要意义。
　　　目前，呕吐毒素的检测方法有液相色谱法，酶联免疫法，免疫胶体金法，
（1）呕吐毒素半抗原合成（合成技术路线见下图）
 20-100mg呕吐毒素,与1-3mol马来酸酐，在2-5ml甲苯中，于80℃搅拌反应，8-20h后，蒸干溶剂，酸化，萃取，重结晶后得到呕吐毒素半抗原。
（2）呕吐毒素全抗原合成
将呕吐毒素半抗原与牛血清白蛋白欧联得到免疫原。
取60mg牛血清白蛋白溶于9.5ml PBS（0.01mol/L,pH5.0）溶液中，加入12.5mgEDC,加入1mlDMF溶解的10mg呕吐毒素半抗原，室温搅拌1h,再加6mg EDC，暗处搅拌反应并过夜，用0.01mol/LPBS透析3天，每天换3次透析液，得到呕吐毒素与牛血清白蛋白的免疫抗原。