淀粉酶ELISA试剂盒

美国DRG原装进口，货号EIA4460

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预期用途

此酶免试剂盒可检测人血清和尿液中的胰淀粉酶

仅供研究使用，不能用于诊断

实验原理

此酶免试剂盒依据的是夹心法原理。包被孔内包被有抗人胰淀粉酶抗体，样品与酶联物在包被孔内孵育，未结合的酶联物被洗去，样品中的人胰淀粉酶浓度与结合的酶联物量成正比，加入底物液后，样品中的人胰淀粉酶浓度与颜色的强度成正比

注意事项

1.       此试剂盒仅用于研究，不能用于诊断

2.       不同批次的试剂盒成分不能混合使用

贮存和稳定性

1.       试剂盒装在含有干燥剂的密封袋内，贮存于2-8℃冰箱内

2.       未打开的试剂盒可保存至有效期

3.       TMB底物液带有微弱的颜色，如变蓝，则应丢弃。贮存或使用期间不要将试剂暴露于强光下。

试剂盒组成

1.       微孔板，96T，包被有抗人胰淀粉酶抗体

2.       样品稀释液，11ml，1瓶

3.       酶联物，11ml，HRP标记的抗人胰淀粉酶抗体

4.       参考标准品0.3ml/支，浓度为：10,50,150,300,600U/L

5.       质控品，0.3ml，参考值见瓶身

6.       TMB底物液，11ml，含过氧化氢和TMB的缓冲液

7.       洗涤缓冲液，100X，10ml，工作洗涤液的配制：10ml洗涤液+990ml去离子水

8.       终止液，2N HCL

9.       板架

实验所需材料但试剂盒未提供

1.       酶标仪

2.       移液器，体积“10,50,100ul

3.       1L洗涤缓冲液

样品采集与处理

静脉穿刺采集全血，允许凝集，室温下通过离心分离出血清，贮存于无菌试管内

如果血清不立即使用，则可保存于2-8℃下1个月，或是在-20℃冻存6个月。避免反复冻融

实验准备

1.       实验前，将所有试剂平衡至室温，轻轻振荡

2.       准备好实验所需的所有试剂，一旦实验开始，就不能中断

3.       每个样品都使用新枪头吸取

实验步骤

1.       将实验所需的板条固定好

2.       加10ul的标准品和样品于相应的孔内

3.       每孔加入100ul的酶联物

4.       室温下孵育60min

5.       洗涤液洗板5次（300ul/孔）

6.       每孔加入100ul的TMB底物液，包括blank 孔

7.       室温下孵育30min

8.       每孔加50ul终止液终止反应，然后在酶标仪450nm处读数

结果计算

1.       以参考标准品的浓度为X轴，吸收值为Y轴，在坐标纸上绘制曲线

2.       从标准曲线上可得到样品中胰淀粉酶的值

标准曲线经典例子

 

 

 

附：采用全自动酶标仪检测，只需检测前设置好酶标仪的相关参数，如坐标参数（线性，半对数）和计算方式参数（三次回归、四参数或双对数曲线方程），可直接得出结果

 

 

 

 

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