关键词:细胞转染、稳定表达细胞株的建立
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服务商: 北京凯诺春天生物技术服务部 | 查看该公司所有服务 >> |
理论支持:
1、脂质体转染
原理:将需转移的DNA或RNA包裹于脂质体,通过脂质体与细胞膜的融合将DNA或RNA转入宿主细胞内。 因此,细胞膜通透性高的细胞,脂质体复合物较易进入,转染效率较高;而有的细胞系本身就不容易被转染。
2、电穿孔转染
原理:电流能可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内。优势:细胞范围广,无论悬浮细胞还是贴壁细胞,均能被有效转染。缺点:高电场强度会对细胞具有较强的杀伤效应。
目前本公司正在引进更为先进的电穿孔仪,能够有效减轻对细胞的杀伤作用。
3、腺病毒感染
对于脂质体和电穿孔都无法转染的细胞,可采用腺病毒感染的方式进行目的分子的导入。优点:感染效率高。缺点:只能瞬时表达。
服务内容:
一、确认细胞对质粒载体或腺病毒载体的转染效率
二、转染携带目的基因的质粒载体,G418筛选(或流式细胞分选)后建立稳定表达细胞株
三、对携带目的基因的载体(质粒载体或腺病毒载体)进行相关检测实验