蛋白质免疫印迹（Western Blot）

原理简介

  Western Blot是一种用于分离和鉴定蛋白质的技术。它利用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 来分离指定样品中包含的各种蛋白质，然后将分离的蛋白质转移到硝酸纤维素或 PVDF 膜上，再将膜与对应目标蛋白质的特异抗体一起孵育。在洗膜过程中，未结合的抗体被洗掉，只留下与目标蛋白质结合的抗体，最后通过显影胶片或荧光扫描来检测结合的抗体。由于抗体仅与目标蛋白质结合，因此看到的带一般就是目的条带，条带的粗细对应于蛋白质量。通过分析特定反应的位置和强度，可以获得目标蛋白在给定细胞或组织匀浆中的表达信息。
  由于凝胶电泳的高分辨率和免疫的强特异性和高灵敏度，Western印迹分析可检测低至1ng的靶蛋白。该方法广泛应用于分子生物学、生物化学、免疫遗传学等分子生物学领域。
 

服务流程

　　①细胞或者组织总蛋白提取；
　　②蛋白质定量；
　　③SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳；
　　④蛋白质转膜（硝酸纤维素或 PVDF）；
　　⑤膜的封闭；
　　⑥一抗、二抗孵育；
　　⑦显影检测；
　　⑧数据分析，交付结果。

 

技术要求

　　①提供的细胞或者组织样品尽可能新鲜，组织块大于100 mg；细胞大于6×106；
　　②说明样品上样顺序信息；
　　③客户需要自备一抗，或者由本公司代购一抗；
　　④收到样品后7~10个工作日内向客户交付实验数据；

 

服务优势

　　①团队经验丰富；
　　②交付周期短，提供原始图片以及试验记录，保证数据真实可靠；
　　③本公司所用的电泳设备、一抗、二抗、显影液和显影仪都是进口的，确保实验的高灵敏度以及高特异性；
　　④可以检测pg级别的低浓度蛋白。

安徽中科圣安生物技术有限公司总部位于安徽省合肥市，核心团队成员由分子生物学、免疫学、细胞学等领域的博士硕士组成，由在国内科研领域有着多年从业经验的专业技术团队和企业管理团队组建而成，中科圣安生物一直秉承着“以人为本、诚信与品质”的发展理念。 　　中科圣安生物立足于生命科学，为基础生命科学研究领域的科学工作者提供生物学先进技术服务，公司以TurboID邻近标记(Proximity labeling, PL)技术为核心基础，致力于为科研工作者定制目标蛋白质互作网络数据库，为系统地解析蛋白质的功能，揭示生命体的奥秘提供了有力且可靠的技术支持。 　　同时，公司依靠自身的优势，还为科学工作者提供分子生物学技术服务，主要业务包括：酵母双杂交一对一互作验证；GST下拉实验（GST-pull down assay）;免疫共沉淀（co-Immunoprecipitation，co-IP）；双 分 子 荧 光 互 补 实 验 （ Bimolecular fluorescence complementation, BiFC）；荧光素酶互补成像技术（Luciferase complementary imaging，LCI）；凝胶阻滞实验（Electrophoretic Mobility Shift Assay，EMSA）；亚细胞定位（观察蛋白的定位情况）；TurboID邻近标记技术构建蛋白互作网络数据库等等。