凝胶阻滞实验　EMSA

原理简介

　　凝胶阻滞（Electrophoretic mobility shift assay, EMSA）实验是体外分析DNA与蛋白质相互作用的一种特殊的凝胶电泳技术。其原理为蛋白质与核酸分子结合后将大大增加其相对分子质量，而凝胶电泳中核酸的迁移率与其相对分子质量成正比，因此没有结合蛋白质的核酸片段跑得快，而与蛋白质结合形成复合物的核酸则跑得慢。

实验流程

　　凝胶阻滞（Electrophoretic mobility shift assay, EMSA）实验是体外分析DNA与蛋白质相互作用的一种特殊的凝胶电泳技术。其原理为蛋白质与核酸分子结合后将大大增加其相对分子质量，而凝胶电泳中核酸的迁移率与其相对分子质量成正比，因此没有结合蛋白质的核酸片段跑得快，而与蛋白质结合形成复合物的核酸则跑得慢。

　　①构建表达载体：目的基因克隆或目的基因合成；限制性内切酶酶切骨架载体并纯化；目的基因插入骨架载体；转化大肠杆菌，筛选阳性克隆并测序鉴定；
　　②转化表达菌株：将目的表达载体转化表达菌株；
　　③制备目的蛋白：诱导目的蛋白表达并提取纯化目的蛋白；
　　④进行凝胶阻滞（EMSA）实验；
　　⑤拍照记录实验结果。

技术服务范畴

　　1、转录因子与启动子区域的结合验证
　　2、蛋白-核酸复合体的形成
　　技术服务优势：
　　①团队经验丰富；
　　②提供原始图片，保证数据真实可靠。

安徽中科圣安生物技术有限公司总部位于安徽省合肥市，核心团队成员由分子生物学、免疫学、细胞学等领域的博士硕士组成，由在国内科研领域有着多年从业经验的专业技术团队和企业管理团队组建而成，中科圣安生物一直秉承着“以人为本、诚信与品质”的发展理念。 　　中科圣安生物立足于生命科学，为基础生命科学研究领域的科学工作者提供生物学先进技术服务，公司以TurboID邻近标记(Proximity labeling, PL)技术为核心基础，致力于为科研工作者定制目标蛋白质互作网络数据库，为系统地解析蛋白质的功能，揭示生命体的奥秘提供了有力且可靠的技术支持。 　　同时，公司依靠自身的优势，还为科学工作者提供分子生物学技术服务，主要业务包括：酵母双杂交一对一互作验证；GST下拉实验（GST-pull down assay）;免疫共沉淀（co-Immunoprecipitation，co-IP）；双 分 子 荧 光 互 补 实 验 （ Bimolecular fluorescence complementation, BiFC）；荧光素酶互补成像技术（Luciferase complementary imaging，LCI）；凝胶阻滞实验（Electrophoretic Mobility Shift Assay，EMSA）；亚细胞定位（观察蛋白的定位情况）；TurboID邻近标记技术构建蛋白互作网络数据库等等。