免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量。
实验流程:组织固定→灭活内源性过氧化物酶→PBS清洗—封闭→一抗孵育→PBS清洗→二抗孵育→ PBS清洗→DAPI复染→防荧光淬灭封片剂封片→荧光显微镜观察,拍照。
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