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线粒体荧光探针——专题

线粒体荧光探针——专题


MitoTracker Red CM-H2XRos,MitoTracker Green FM
线粒体是一种存在于大多数真核细胞中的由两层膜包被的细胞器,直径在0.5-10微米左右。线粒体有“细胞动力工厂”之称,是细胞内氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的主要场所,主要为细胞活动提供能量。
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最后更新:2023-10-10半年访问:55
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线粒体荧光探针专题
MitoTracker 系列探针则是Invitrogen专为线粒体而设计的。MitoTracker是细胞通透性的,只要与细胞简单孵育,就能被动渗透质膜,在有活性的线粒体中积累。一旦线粒体被标记,细胞就能用甲醛固定剂固定,一些MitoTracker探针能在固定之后保留在线粒体内。这对致病细胞格外有用。而一些探针在随后的去污剂处理后还能保留,这样就能用在免疫细胞化学或原位杂交中。尽管传统的线粒体探针如Rhodamine 123也很容易标记线粒体,但是一旦线粒体的膜电位损失,它们就很容易被洗掉。这就限制了某些应用。
MitoTracker探针又分为好几种,且有红色、绿色和橙色。其中还原态的MitoTracker Orange CM-H2TMRos和MitoTracker Red CM-H2Xros在进入细胞后不发出荧光,直到它们被氧化成相应的线粒体选择性探针,并聚集在线粒体内。红色的MitoTracker探针都适合于多色标记实验,因为它们的红色荧光能与其他绿色荧光很好地区分开。尽管有些MitoTracker探针能实现固定细胞中的线粒体标记,但这些染料还是只推荐给活细胞。如果你想要标记固定细胞,可以选择OxPhos的抗体+荧光二抗。
MitoTracker系列探针专用于检测活细胞线粒体,具有细胞通透性,易于在有活性的线粒体中积累。一旦线粒体被标记,细胞就能用甲醛固定剂固定,一些MitoTracker探针能在固定之后保留在线粒体内。尽管传统的线粒体探针如Rhodamine 123也很容易标记线粒体,但是一旦线粒体的膜电位损失,它们就很容易被洗掉。
MitoTracker系列探针具有多种颜色,适合于多色标记实验。MitoTracker GreenFM 是线粒体绿色荧光染料,这种染料定位于线粒体的能力看起来不受线粒体膜电位影响。 该染料可以对活细胞进行染色,但是乙醛固定后不能稳定保存。 MitoTrackerRed CMXRos 是一种红色荧光染料,用于对活细胞线粒体进行染色,并且该染料的积累取决于膜电位。 乙醛固定后,该染料可稳定保存。MitoTracker RedCM-H2XRos 是 MitoTracker Red 的非荧光还原态,在氧化时才会发出红色荧光。该染料也可以对活细胞线粒体进行染色并且其积累取决于膜电位。 乙醛固定后,该染料可稳定保存。但是,该染料在体外发生氧化反应,就不能检测到荧光,所以要求保存在惰性(如氮气)气体中。MitoTracker? DeepRed FM 是一种远红荧光染料(Ex/Em约为 640/662 nm),用于对活细胞线粒体进行染色,并且该染料的积累取决于膜电位。 乙醛固定后,该染料可稳定保存。
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