ORF克隆是指从样本组织或细胞中抽提总RNA,反转录,设计合成特异性引物后,通过RT-PCR扩增获得目的基因的DNA序列,获得编码全长蛋白质序列的DNA序列。
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实验原理
ORF克隆是指从样本组织或细胞中抽提总RNA,反转录,设计合成特异性引物后,通过RT-PCR扩增获得目的基因的DNA序列,获得编码全长蛋白质序列的DNA序列:即从起始密码ATG到终止密码子,不含5′和3′UTRs非翻译区及内含子序列。
实验流程
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