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液质联用体现了色谱和质谱优势的互补,将色谱对复杂样品的高分离能力,在药物分析、食品分析和环境分析等许多领域得到了广泛的应用。
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特点:
1.样品处理步骤较少,样品损失相对较少
2. 对人员要求较高
3.质谱数据分析难度加大
4.无实测分子量信息
2D-LC简介
第一维:离子交换色谱
SCX (强阳离子交换) 或者SAX (强阴离子交换)
SCX:利用多肽在酸性pH (2.8-3.2之间) 条件下,大部分多肽带上+1或者+2等多个正电荷而与色谱柱上的强酸根离子(磺酸基) 结合,再改变流动相的盐离子浓度或者pH梯度将
多肽洗脱下来。
第二维:反向高效液相色谱通常为RHPLC
原理:多肽分子中的疏水与亲水氨基酸的多少决定分子的极性大小,分子中的非极性基团与
柱子上的非极性链发生疏水相互作用而结合,极性大的分子将先被洗脱下来
使用溶剂:乙腈、水,常添加一些酸
特点:反向HPLC分辨率高,溶剂容易挥发与质谱能无缝的实现在线联用
液相色谱-质谱联用(LC-MSMS)可解决如下几方面的问题:不挥发性化合物分析测定;极性化合物的分析测定;热不稳定化合物的分析测定;大分子量化合物(包括蛋白、多肽、多聚物等)的分析测定。