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销售商: 杭州优米仪器有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
微量紫外吸收检测 | 荧光检测 | |
概况 | 快速简单 - 可直接测量纯化样品,无需稀释 | 特异性测量dsDNA,ssDNA,总RNA、microRNA浓度 |
原理 | 紫外吸收检测 | 荧光染料将检测 |
流程 | 1.将样品移液到基座上 2.读取吸光度 |
1.将样品与试剂混合 2.孵化2-5分钟; 3.读取荧光值 注:测试前需配置标准曲线 |
应用 | 对DNA,RNA和蛋白质的浓度和纯度进行评估 | 当样品浓度极低(<2ng/ul)或需要更高的灵敏度或怀疑核酸污染物时(例如RNA中含有的DNA或dNTPs) |
dsDNA定量范围(ng /μl) | 2-15,000 | 0.01–1000 |
核酸样品纯度评估 | 样品纯度简单评估 A260/A280 A260/A230 根据二者比值进行简单评估 |
无法对样品纯度进行评估 |
微量紫外吸收检测 | 荧光检测 |
提供预编程的一些应用 1.直接定量A280 2.缺乏色氨酸和酪氨酸残基的蛋白质或肽的A205肽键吸光度 3.比色法蛋白质测定:Bradford、BCA、Lowry |
1.荧光检测可显示出蛋白质与蛋白质之间微小的差异(BSA、鸡卵白蛋白、鸡蛋溶菌酶、IgG等均可区分); 2.检测结果不会被大多数污染物干扰,包括盐类、还原剂(DTT,β-巯基乙醇)、DNA和氨基酸,但不能清除洗涤剂。 |
微量紫外吸收检测 | 荧光检测 | |
常规PCR | 由于常规PCR已广泛应用,通常只需用微量检测来量化模板。 |
荧光检测亦适用于常规样品,但是当样品中含有A260的污染物时(dNTPs,寡核苷酸,RNA等),荧光检测是更好的选择。 |
定量PCR | 微量检测可通过260/280、260/230等比值来判断核酸纯度,避免因样品问题导致的引起的扩增失败(例如苯酚等)。 | 荧光检测可精确定量核酸浓度,但是不能反应样品纯度,而低纯度样品可能对PCR反应会存在抑制现象。 |
测序 | 通常可用微量来量化模板。 | 如果样品在260nm处容易产生大量的污染物,则高特异性的荧光检测能更准确的得到实验结果。 |
NGS | 在库构建过程中,当允许不影响下游实验的污染物存在时,可用微量检测 | 可靠的NGS结果需要高度准确的模板浓度,荧光检测的特异性和灵敏度更符合需求。 |
RT-qPCR | 标准RNA提取不易受DNA污染,因此微量检测可用于确定下一步反应的RNA量。 | 荧光检测检测的特异性和灵敏度适用于常规样品,当样品含有DNA污染或降解RNA(dNTP或NTP),则荧光检测检测是优选。 |
二者直观的工作流程 1.选择 2.阅读样本 3.查看结果 |
型 号 | UNano-3000 | |
波长范围 | 190-850nm | |
样本量 | 0.5-2ul | |
光程 | 0.05mm、0.2mm、1.0mm 自动切换 | |
光源/寿命 | 氙灯/109次 | |
检测器 | 2048 单元线性 CCD 阵列 | |
光谱带宽 | 2nm | |
吸收光精确度 | 0.003Abs | |
吸光度准确性 | ±1%(7.332Abs at 260nm) | |
吸光度范围 | (等效于10mm) 0.04 - 300A | |
核酸浓度范围 | 2ng/μL dsDNA~15000ng/μL dsDNA | |
检测时间 | 6秒 | |
OD600 | 吸光度范围 | 0~4.000 Abs |
吸光度稳定性 | [0,3)≤0.5%, [3,4)≤2% | |
吸光度重复性 | [0,3)≤0.5%, [3,4)≤2% | |
吸光度准确性 | [0,3)≤0.005A+1%;[3,4)≤2% | |
荧光检测 | 激发波长460nm发射波长525nm | |
荧光检测 | 线性度 | R2>0.995 |
重复性 | <1.5% | |
稳定性 | <1.5% | |
打印 | 内置热敏打印机 | |
数据输出方式 | USB | |
样品基座材质 | 石英光纤和高硬质铝 | |
输入电压 | VAC 100-240V;VDC 24V 2A | |
功率 | <15W (待机5W) | |
外形尺寸 | 208*290*180 (W×D×H) | |
重量 | 3.2Kg |
通道 | 激发波长 | 用途 |
Blue | 470nm | PicoGreen、Oligreen、RiboGreen |