特别提示:包括糖苷内切酶H在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:糖苷内切酶H
英文名称:BalbEndo H
产品货号:JN3018
产品规格:10KU
BalbEndo H是一种重组无标签糖苷酶,能够专一切割β-1,4-糖苷键连接的高甘露糖型结构和某些杂合型糖蛋白,形成带有一个N-乙酰葡萄糖胺的糖蛋白结构。切割后的蛋白仍具有生物活性,不影响其功能等的后续研究。本制品克隆自褶皱链霉菌(streptomyces plicatus)并在E.coli中重组表达,经多步纯化获得。
产品用途:
- 去除糖蛋白的N-连接高甘露糖。
- 仅切割高甘露糖型结构(n=2-150,x=(Man)1-2,y=H)和杂合型结构(n=2,x和/或y=AcNeu-Gal-GlcNAc)。
产品组成:
组分 |
规格 |
BalbEndo H(500U/μl) |
20μl |
10×Glycoprotein Denaturation Buffer |
1ml |
10×Endo H Reaction Buffer |
1ml |
保存温度:-20℃。
贮存液:
20mM Tris,50mM NaCl,5mM EDTA pH7.5。
质量保证:
无外切糖苷酶污染,无蛋白水解活性。
活性定义:
在10μl的反应体系中,37℃条件下,1小时从10μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需的酶量定义为一个单位。
注意事项:
- 酶活性不受SDS影响。
- 要使天然糖蛋白去糖基化,可尝试增加酶量,延长温育时间。
建议反应条件:
将1×Glycoprotein Denaturation Buffer(0.5%SDS,40mM DTT)中100℃煮沸10分钟使其变性,然后在1×Endo H Reaction Buffer(50mM柠檬酸钠pH5.5,25℃)中于37℃温育,进行酶切反应。
常用反应体系(20μl)
第一步:
成分 |
用量 |
10×Glycoprotein Denaturation Buffer |
1μl |
底物 |
10μg |
ddH2O |
至10μl |
100℃,反应10min |
第二步:
成分 |
用量 |
10×Endo H Reaction Buffer |
2μl |
第一步反应液 |
10μl |
BalbEndo H(500U/μl) |
1μl |
ddH2O |
至20μl |
37℃,60min |
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产品组成:
成份 |
规格 |
T3 RNA聚合酶 |
50μL(20U/μL) |
5×转录缓冲液 |
0.25mL |
使用手册 |
1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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