货号 |
CTCC-001-0008 |
CTCC-001-0055 |
CTCC-001-0022 |
CTCC-001-0036 |
种属 |
人源 |
人源 |
人源 |
人源 |
组织来源 |
皮肤 |
肺 |
皮肤 |
肺 |
疾病 |
恶性黑色素瘤 |
癌 |
表皮样癌 |
癌症 |
年龄 |
54岁 |
52岁 |
85岁 |
58岁 |
性别 |
女 |
男 |
女 |
男 |
细胞类型 |
表皮细胞 |
上皮细胞 |
表皮细胞 |
表皮样细胞 |
生长特性 |
贴壁生长 |
贴壁生长 |
贴壁生长 |
贴壁生长 |
生物安全等级 |
1 |
1 |
1 |
1 |
储存温度 |
液氮中保存 |
液氮中保存 |
液氮中保存 |
液氮中保存 |
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货号 |
CTCC-001-0038 |
CTCC-001-0020 |
CTCC-001-0028 |
CTCC-001-0033 |
种属 |
人源 |
人源 |
人源 |
人源 |
组织来源 |
胃 |
结肠 |
外周血 |
结肠 |
疾病 |
胃腺癌 |
结肠腺癌 |
急性淋巴细胞白血病 |
结肠腺癌 |
年龄 |
54岁 |
72岁 |
4岁 |
70岁 |
性别 |
女 |
男 |
女 |
男 |
细胞类型 |
表皮细胞 |
表皮样细胞 |
淋巴细胞 |
表皮细胞 |
生长特性 |
贴壁生长 |
贴壁生长 |
悬浮生长 |
贴壁和悬浮 |
生物安全等级 |
2 |
1 |
1 |
1 |
储存温度 |
液氮中保存 |
液氮中保存 |
液氮中保存 |
液氮中保存 |
拆包和储存
1. 请立即检查包装是否有破损或漏液
2. 请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出,并按照下方操作步骤进行培养或传代。
注意:如为冻存管,请收到后立即解冻进行培养。
培养瓶中细胞操作步骤
对于贴壁培养的细胞,寄送前,我们会将培养基充满整个培 养瓶,以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。
- 收到细胞产品后,请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒 置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因在运输过程 中存在颠簸,且有些细胞对温度变化也很敏感,可能存在一些 细胞脱落漂浮的情况,这些细胞仍是活细胞,请勿丢弃,可离 心富集后传代使用。
- 对于贴壁培养的细胞,在生物安全柜环境中,用真空泵去除 培养瓶中的多余培养基,至剩余5-8 mL左右,随后将细胞置于 含有5% CO2的37℃恒温 培养箱中培养。如果细胞已经长满培养 瓶,请立即传代。
- 对于悬浮培养的细胞,在生物安全柜环境中,转移培养瓶中 的细胞至离心管中,离心200×g /5 -10 min,去除上清后,用5mL 培养基吹散细胞,转移至新的培养瓶中,随后置于含有5% CO2 的37℃恒温培养箱中培养。
冻存细胞操作步骤
注意:为保证细胞的高存活率,请收到产品后,立即解冻培养。
- 将冻存管置于37℃水浴中来回晃动,迅速解冻。为避免污染, 确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速,大约2分钟。
- 一旦冻存管中液体融化后,立即取出,采用70% 酒精喷拭冻存 管表面。从此步开始,后续操作须在生物安全柜中完成。
- 将冻存管中的液体转移到含有5 mL完全培养基的离心管中,离 心200×g /5 -10 min,用真空泵去除含有冻存液的上清。
- 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证 细胞复苏的存活率,请将培养基在37℃水浴预热后使用。
- 将细胞置于含有5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。
贴壁细胞传代培养
- 吸取并弃掉培养瓶中培养基。
- 加入 1 mL 0.25%(w/v)Trypsin - 0.53 mM EDTA溶液,并置于37 ℃培养箱中孵育,直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3 至5 分钟(此处为12.5 cm2 培养瓶所用体积,可根据实际情况增减 用量)。
- 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶,并轻轻吹打将细胞从培养 瓶表面吹落,并使细胞分散。
- 离心200 x g /5min,去除上清后,取适量的培养基将细胞重悬, 取适量悬液置于新的培养瓶中,并加入新鲜细胞完全培养基至总 体积为4 mL。
- 将细胞置于含有5% CO2 的37℃恒温培养箱中培养。
传代比例: 建议1:3至1:8
培养基换液: 每隔2至3天。
细胞冻存液
细胞冻存液,请使用产品:Cryo Forzen Medium (Cat#CTCC-002-002)
使用范围:本产品仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
完全培养基配置:该细胞系培养所用基本培养基为Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM),配置完全培养基时需加入10%FBS。
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