特别提示:包括大肠杆菌DH5α菌种在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:大肠杆菌DH5α菌种
英文名称:E.coli DH5α Strain
产品货号:BTN12-11y
产品规格:1 mL
本菌种是美国科学家D.Hanahan在1983年首次报道的K-12系大肠杆菌菌株,它是以DH1为基础构建的,是分子生物学中最常用的用于克隆的大肠杆菌菌株。
产品特点:
1.转化效率比DH1更高,适用于分子克隆。
2.脱氧核糖组成型合成,适合扩增制备高拷贝和大型质粒。
3.携带?-半乳糖苷酶?片段,如果外源基因携带此酶的?片段,则可以进行蓝白斑筛选重组子。
4.内源核酸酶EndA1缺失,提取的质粒DNA残留DNase少,质量高。
5.基于RecA的三套重组系统均缺失,质粒在复制过程发生重组、丢失和串环的可能性降到最低,使得插入片段稳定。
6.EcoK限制功能缺失(hsdR-),不能酶切在EcoK位点没有甲基化的DNA,但其修饰功能完整,故可以用EcoK位点非甲基化质粒通过本菌株制备其对应的甲基化质粒,后者可用来转化限制EcoK功能正常(基因型为hsdR+)的K-12系的大肠杆菌。
7.本菌株对常见抗菌素没有抗性。
基因型:
大肠杆菌DH5菌种的基因型是:K-12,F-,φ80,-,Δ(argF-lac)169,lacZ58(M15),ΔphoA8,glnX44(AS),deoR481,rfbC1,gyrA96(NalR),recA1,endA1,thiE1,hsdR17(各文献上报道的基因型稍微有所不同,此处采用美国耶鲁大学Coli Genetic Stock Center的资料)。
大肠杆菌DH5菌种基因型符号及其含义列表如下:
基因型 |
表现型 |
K-12 |
K-12系的所有菌种默认都携带F因子和λ、e14、rac三种原噬菌体。其中的e14携带野生型mcrA基因,其产物可对甲基化的CG切割。 |
F- |
此菌株缺失F因子 |
λ- |
此菌株缺失λ原噬菌体 |
φ80 |
携带φ80原噬菌体 |
Δ(argF-lacZ)U169 |
也叫ΔlacU169,来于Hfr3000U169菌种,位于此区域的lac操纵子和过氧化氢敏感基因缺失,使细菌抗过氧化氢,实际缺失mmuP到argF和lac到mhpD的区域,实为Δ(mmuP-mphD) |
rfbC1 |
LPS合成缺失,缺失LPS有助于提高转化效率 |
deoR481 |
deo操纵子阻遏蛋白失活,脱氧核糖组成型合成,适合扩增制备质粒 |
endA1 |
核酸内切酶I缺失 |
glnX44(Am) |
同supE和 glnV,使琥珀终止子编码谷氨酰胺,为部分噬菌体生长所需 |
gyrA96 |
DNA促旋酶失活,导致对萘啶酮酸和荧光喹啉的抗性 |
hsdR17 |
EcoK系统的限制性内切酶Eco失活,不酶切非甲基化的Eco位点 |
ΔlacZ58M15 |
原ΔlacZM15,携带来于M15菌株的、编码β-半乳糖苷酶的ω片段,与编码β-半乳糖苷酶α片段的质粒互补可,恢复酶活性,用于蓝白斑筛选 |
recA1 |
ATP依赖型重组酶失活,recBCD、recE和 recF三条重组路径均复丧失,重组率降低1万倍。适合扩增有回文结构的高拷贝质粒 |
thiE1 |
原thi-1,不能合成硫氨(维生素B1) |
保存条件:-80℃,有效期一年。
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