氮自由基DPPH清除能力测试试剂盒惠诚现货

氮自由基（DPPH）清除能力测试试剂盒
（A001-96T 分光光度计法）
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一、 测定原理
DPPH自由基是一种较稳定的含氮自由基，有一个单电子，在517nm下有强吸收，如果有其他物质提供一个电子使此单电子配对，其吸收会消失褪色，褪色程度与接受电子的量呈正比。即反应物清除氮自由基的能力与试剂在517nm的吸光值成反比。
二、 试剂组成
试剂一：DPPH试剂1mL×1瓶
试剂二：100μg/mL 维生素C标准溶液 20mL×1瓶
三、 储存条件及有效期
试剂盒-20℃可保存6个月。
四、 试剂的配制
试剂一：37℃平衡20min以上，待试剂融化后，在试剂瓶中加入100ml 95%乙醇或无水乙醇，剧烈震荡使试剂充分溶解。
注意：溶解一定要充分，如有条件可采用超声波助溶。
试剂二应用液：根据是否需要制作阳性对照标准曲线有两种配制方法。
1. 如仅需要将维生素C作为质控品，可取100μL 试剂二，加入900μL样品稀释液，充分混匀；
2. 如需测定维生素C的IC₅₀，可分别移取0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，4.0，5.0mL 试剂二于空离心管中，再依次加入10.0，9.5，9.0，8.5，8，7.5，7.0，6.0，5.0ml样品稀释液，充分混匀。配制成0，5，10，15，20，25，30，40，50 μg/mL 维生素C样品。
五、 操作步骤

	空白孔1	测定孔	对照孔2	质控孔
试剂一（mL）	1	1	0	1
样品溶液（mL）		1	1
试剂二应用液（mL）				1
样品稀释液（mL）	1

充分混匀，室温避光静置30min使之充分反应。选用0.5mm比色皿³，517nm处测定吸光值。
¹空白管很重要，建议做3个以上平行；
²如样品颜色较浅可不做对照管；
3如无0.5cm比色皿，可将样品和试剂体积均按1.5ml加样，使总体积为3ml，则可使用1cm标准比色皿。
 
六、计算公式
 
注：1 如未做对照孔，可以将其视作为0；
       2 质控孔求值时将其视作测定孔进行计算即可。
 
七、注意事项
1. 如样品中色素物质不是分析对象，建议先通过SEP C18柱进行脱色处理，处理后样品可不做对照孔；
2. 如不确定样品的氮自由基清除能力，可先做不同浓度的稀释液进行摸索，并选择适宜浓度进行测定，高浓度下，浓度与清除率间并不线性相关。

除此之外氮自由基（DPPH）清除能力测试试剂盒,还有A001-96T 酶标板法.

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