条件性基因敲除

 

条件性基因敲除小鼠

条件性基因敲除小鼠与全敲小鼠的应用区别在于条件性基因敲除小鼠可以使靶基因的表达或缺失发生在小鼠发育的某一阶段或某一特定的组织器官，而该基因在其它组织或细胞表达正常。从而使对小鼠基因组的修饰的范围和时间处于一种可控状态。

条件性基因敲除小鼠技术原理:

条件性基因敲除主要是通过染色体位点特异性重组酶系统Cre-LoxP和 FLP-FRT来实现的。比如在待敲除的一段目标DNA序列的两端各放置一个LoxP（或FRT）序列，得到flox（Flanked by loxP)小鼠。将flox小鼠与带有细胞特异性表达的Cre(或Flp)的小鼠交配繁殖，以获得在特定细胞里把目标基因敲除掉的小鼠，即条件性基因敲除小鼠。其应用可以使靶基因的表达或缺失发生在实验动物发育的某一阶段或某一特定的组织器官，从而使对小鼠基因组的修饰的范围和时间处于一种可控状态。

条件性基因敲除小鼠制备技术对比

目前，条件性基因敲除小鼠可通过基于胚胎干细胞的基因打靶技术、EGE技术（基于CRISPR/Cas9 技术）获得。

技术名称	优势	局限性
基于胚胎干细胞的基因打靶技术	成熟、可靠、精细是目前为止唯一一个可以满足几乎所有基因组修饰要求的打靶技术	1）需要ES细胞，目前只有小鼠有高效的ES细胞，其它模式动物的ES细胞还不能实现大规模应用。 2）周期长、工作量大、费用相对比较高
EGE技术	基因敲除/敲入效率高，速度快，可实现多基因、多物种基因敲除/敲入，系统构建简单	1）存在脱靶风险，但通过选择合适的sgRNA可以有效降低脱靶率， In vivo脱靶可通过传代去除 2）敲入存在有机插入风险，但可通过Southern blot 筛除

 

 

条件性基因敲除小鼠应用

1、用于具有胚胎致死性目的基因的研究；

2、用于研究基因在特定的组织或细胞中的生理病理功能；

3、与控制Cre或Flp表达的其它诱导系统相结合，还可以对某一基因的表达同时实现在时间和空间两方面的调控。

条件性基因敲除小鼠制备服务优势

Specialty-最专业的设计方案

-百奥赛图团队专注基因敲除 20余年，为您提供最专业的设计方案。

 

Special-独特技术体系

 

百奥赛图在已有技术的基础上，进行层层优化，形成独特技术体系。

-C57BL/6 胚胎干细胞（省去回交时间）

-EGE（基于Cas9技术）:百分百RNA注射（降低随机插入率）

 

Strict-严格质控标准

 

实施双重质控金标准，让您放心拿到模式鼠。

-southern杂交（模式动物验证金标准）

-染色体核型分析（最佳ES细胞注射）

 

Standard-标准操作流程

 

严格按照SOP进行实验，预防操作陷阱。

 

我们给您的终产品

不少于两只的F1杂合子小鼠以及相关实验数据。

我们会提供给您相关的检测方法和最终检测报告，您可以自己进行核实检测，也可以在我们的帮助之下完成。

在您的课题进行过程中，我们会每两周为您发送一次课题进展汇报，内容包括课题进展的每一步结果（包括电泳图、PCR结果、酶切结果和杂交结果等），让您清楚的了解自己课题的进展情况，就如同自己的学生在做lab meeting 一样。

条件性基因敲除小鼠订制方式：

邮箱：info@bbctg.com.cn

电话：010-56315318

 

 

1.重度免疫缺陷小鼠 B-NDG小鼠
http://www.bbctg.com.cn/index/article/index/aid/52.html
2.各种免疫检查点人源化小鼠
http://www.bbctg.com.cn/index/index/pro/id/29/cid/27.html
3.CDX肿瘤模型
http://www.bbctg.com.cn/index/index/pro/id/32/cid/31.html
 

 

百奥赛图是一家创新技术驱动新药研发的国际性生物技术公司，致力于成为全球新药发源地，以专注技术创新、持续新药产出、守护人类健康为使命。基于百奥赛图自主研发并拥有完全独立知识产权的全人抗体RenMab^®、RenLite^®、RenNano^®小鼠，将单细胞抗体发现技术平台、高效的基因编辑模型开发平台、规模化动物模型供应平台、快速的动物体内外药效评价平台、强大的临床开发能力有机整合在一起，形成了独具特色、涵盖药物研发全流程的新药研发体系。公司成功战略升级为Biotech，未来将更聚焦于创新抗体药物研发。随着规模化抗体药物研发-“千鼠万抗^TM”计划的实施，百奥赛图将携手全球合作伙伴，共同加速新药研发。百奥赛图总部位于北京，在江苏海门、美国波士顿、上海等地设有分支机构，全资子公司祐和医药专注于临床开发。

公司充分利用其快速整合中美两国优势资源的能力，建立起由“独特的基因打靶载体构建技术”、“传代稳定的C57BL/6遗传背景的小鼠胚胎干细胞”、“精确的显微注射系统”组成的基因敲除小鼠开发与服务平台, 和以CRISPR/Cas9/TALEN技术为核心组建的基因敲除/基因嵌入模式动物开发与服务平台。截止2014年底，以两大平台为依托，已经和正在开发基因敲除/基因敲入小鼠近600种，基因敲除/敲进大鼠50余种，基因敲除/敲进细胞系40余种，灵长类动物4种（与科研院所合作）、斑马鱼5种，成为国际上基因敲除/嵌入模式动物开发最具实力公司之一。
 

公司凭借其独特的技术开发平台、规范的技术操作系统、严格的质量评价体系以及一支开发经验丰富、专业知识互补、执行力强的骨干人才队伍，在成立五年多的时间里，已经建立起国内外广泛的技术服务网络。服务群体不仅包括以哈佛大学，NIH, 东京大学，牛津大学，北京大学，清华大学，中科院动物所，中科院神经所等为代表的国内外科研学术机构，也包括以协和医院、北大医院等为代表的科研实力强大的综合性医院，更包括以强生、罗氏、GSK、默克等为代表的国际顶尖医药企业。