作原位杂交、Northern 杂交的封堵剂,对于探针为 RNA 的杂交试验尤其适用。
成份 编号 规格
精提酵母 tRNA 溶液(5mg/mL) 220121 1.5 mL
低温运输,-20℃保存,有效期一年
自备试剂 :无水乙醇,75%乙醇
使用方法
一:本产品作核酸助沉剂使用
注:由于 tRNA 是多聚核苷酸激酶和末端转移酶的底物,因此如果回收的 DNA 或
RNA 要用于此类反应,就不能使用 tRNA 作为助沉剂,需要改用糖原或聚丙烯酰
胺(需要从本公司另购)。如果回收的 RNA 或 DNA 要用于 RT-PCR 和 PCR 扩增,
最好先确认所用引物不会跟酵母 tRNA 结合,否则可能会产生非特异扩增。
1. 在核酸(DNA 或/和 RNA)溶液中,加入适当种类和浓度的盐离子,盐离子不同
其终浓度也不相同,具体如下:
盐 终浓度
NH4OAc (醋酸铵) 0.5 M
NaCl (氯化钠) 0.25 M
NaOAc (醋酸钠) 0.3 M
2. 加入本产品使其终浓度为 20 ug/mL,混合均匀。
3. 加入两倍体积的自备无水乙醇,混合均匀。
4. 冰上放置 15 分钟。
5. 12000-15000 g 离心 15 分钟以上,小心移弃上清。
6. 用 1mL 75%乙醇洗一次(即加入 1mL 75%乙醇,振荡混匀后 12000-15000
g 离心 5 分钟,小心移弃上清)。
7. 短暂离心数秒,小心移弃残留液体。
8. 将沉淀溶于适当缓冲液中待用。二:本作为杂交封堵剂
本产品可以作为原位杂交液、Northern 杂交液和 RNA 斑点杂交液的封堵剂,
也可以作为 Southern 杂交液和 DNA 斑点杂交液的封堵剂,但不适于作为菌斑杂
交的封堵剂,其在杂交液或预杂交液中的终浓度为 100ug/mL。如果使用 RNA 探
针,最好使用 tRNA 精提液做封堵剂,以保护 RNA 探针。
北京天净沙目前拥有5万多种自产科研试剂产品,包括2万多种PCR和LAMP检测产品(包括动物病原、植物病原、GMO转基因、种源性、中药材真伪、抗药性、SNP)、数千种即用型溶液,数千种即用型DMSZ和ATCC培养基、数千种酶活性和代谢物检测产品(酶法)、数千种质粒和菌种、数千种分子生物学试剂、数千种组织化学和免疫组化产品等。