人乙肝e抗体(HbeAb)ELISA试剂盒

本试剂盒仅供研究使用。
                                                                      96T
 
使用目的：
本试剂盒用于测定人血清,血浆样本中乙肝e抗体(HbeAb)表达。
实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人乙肝e抗体(HbeAb)表达。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中乙肝e抗体(HbeAb)相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人乙肝e抗体(HbeAb)的存在与否。
试剂盒组成

1	30倍浓缩洗涤液	20ml×1瓶	7	阳性对照	0.5ml×1瓶
2	酶标试剂	6ml×1瓶	8	阴性对照	0.5ml×1瓶
3	酶标包被板	12孔×8条	9	说明书	1份
4	显色剂A液	6ml×1瓶	10	封板膜	2张
5	显色剂B液	6ml×1/瓶	11	密封袋	1个
6	终止液	6ml×1瓶

样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
 
操作步骤：

• 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
• 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。待测样品孔中加待测样本50μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，
• 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
• 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
• 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用
• 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
• 显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟
• 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
• 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

计算和结果判定：
  试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.20
  临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
  阴性判定：样品OD值< 临界值（CUT OFF）者为乙肝e抗体(HbeAb)阴性
  阳性判定：样品OD值≥ 临界值（CUT OFF）者为乙肝e抗体(HbeAb)阳性。
注意事项
1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。
2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

• 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

5．底物请避光保存。
6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm
7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月
 

       上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科学领域，科研机构、高校、院所及企业产品开发研究提供所需要的科研类试剂、耗材、仪器、技术服务等。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学，通过公司各个部门所有员工的共同努力在行业内拥有较高知名度，深得新老客户的厚爱，本着“优质、服务、信誉”的精神，坚持以先进的技术、优质的产品、良好的信誉，为国内外广大用户提供优质生物产品和服务。公司在重视产品质量的同时，也建立了一套集技术支持、物流、售后服务等多个部门联动服务体系，努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户本研究所郑重承诺：质量保证、供货及时、服务周到，公司总投资超过2000万元，并先后引进了自动化设备，组建了专业的研发技术团队。凭借着洁净化的生产车间、标准化的质量管理系统，为生产高质量的产品提供了有效保证。
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