酵母双杂交检测-蛋白互作-武汉科谨生物

武汉科谨生物专业从事酵母双杂交文库筛选，酵母双杂交一对一互作验证，配套coIP、GST-pulldown、荧光素酶互补成像LCA、双分子荧光互补BIFC等检测，一站式解决蛋白-蛋白互作。
 
一、技术介绍
酵母双杂交系统（Yeast two-hybrid assay）是用于体内研究蛋白相互作用的一种非常便利的工具，通过在酵母体内重建有活性转录因子的结构来鉴定蛋白质之间的相互作用。常用的如GAL4为基础的酵母双杂交系统，利用GAL4两个结构域：DNA结合结构域（DNA binding domain, GAL4-BD）与激活结构域（Activation domain, GAL4-AD）构建特异载体，并分别与检测蛋白融合。BD可以和上游激活序列（UAS）结合，而AD能激活UAS下游基因进行转录。单独的BD或AD不能激活基因转录，两者只有通过某种方式结合在一起形成完整的转录激活因子的功能。在酵母内表达的两个蛋白若发生相互作用时，就会将GAL4-BD和GAL4-AD相互靠近，从而与上游激活序列(upstream activating sequence, UAS)结合，激活相应报告基因的表达，在相应的营养缺陷型培养基上筛选可能互作的阳性克隆。

酵母双杂交系统应用：
（1）对高通量筛选的相互作用蛋白进一步鉴定；
（2）对预测可能相互作用的蛋白进行确认；
（3）对相互作用的蛋白结构域进行鉴定
 
二、服务内容
（1）酵母双杂交载体构建（pGBKT7-Bait/pGADT7-Prey）；
（2）Bait蛋白的自激活检测；
（3）酵母双杂交点对点检测：分别从共转平板上挑单克隆点板到SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade和SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade+X-α-gal营养缺陷型固体培养基进行验证。
 
三、客户提供样本
  目的基因序列或质粒模板。
 
四、交付结果
完整的实验报告，包括实验数据，平板图片，结果分析等。
 
五、结果展示
（1）Bait蛋白的自激活检测；
（2）酵母双杂交点对点检测，含阴性对照组、阳性对照组和实验组平行结果。
 
 
咨询与订购：
电话：18171021910，18171021510
邮件：corebiolab@163.com
 

武汉科谨生物科技有限公司是一家专业提供生物领域科研技术服务的高新技术型企业，汇聚了多所知名院校的优秀人才，核心团队积累了多年的技术服务经验，拥有较高的客户认可度。 　武汉科谨生物始终秉持对科学严谨的态度，实验结果真实可靠、服务专业优质。公司拥有资源丰富的载体库和肿瘤细胞库，满足客户不同的实验需求。目前已经建立多个标准规范化的实验技术平台，覆盖分子生物、医学、植物、蛋白、抗体等生物科学领域。公司在技术服务上不断进取，致力于为生命科学工作者提供全方位优质的技术支持和服务。 实验平台： 【分子生物检测】 基因克隆、载体构建、荧光定量PCR检测、Southern Blot、基因定点突变、DNA甲基化检测 【生物大分子互作检测】 酵母文库构建、酵母单杂交/双杂交筛库检测、双分子荧光互补BIFC、双荧光素酶报告基因检测、DNA pull down、RNA pull down、GST-pull down、免疫共沉淀coIP、染色质免疫沉淀ChIP-seq、RNA 免疫沉淀RIP-seq、EMSA、Biacore等 【医学检测】 细胞增殖检测、细胞系转染、Western Blot、流式细胞检测、流式凋亡检测、流式细胞周期检测、克隆形成实验、tunel检测、transwell细胞迁移侵袭检测、细胞划痕检测、血管形成实验、免疫荧光、免疫组化、慢病毒包装和稳转细胞株构建、各类动物造模、整体医学项目服务 【植物基因工程】 植物蛋白亚细胞定位、双荧光素酶活性检测、双分子荧光互补BIFC、启动子活性检测、植物组织GUS染色、拟南芥遗传转化、烟草遗传转化、番茄遗传转化、整体项目服务 【重组蛋白表达】 大肠杆菌蛋白表达系统、哺乳细胞蛋白表达系统、酵母蛋白表达系统、枯草芽孢杆菌蛋白表达系统、杆状病毒昆虫细胞蛋白表达系统 【抗体定制】 多克隆抗体制备、单克隆抗体制备、磷酸化抗体制备、重组抗体表达测序、抗体亲和力检测、抗体标记修饰 http://www.corebiolab.cn/ corebiolab@163.com QQ 2207434819