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如何快速简单的保存提取全血RNA
在用血液标本进行基因表达研究时,需要及时把新鲜血液中有核细胞的RNA提取出来。全血还不能直接放到-80℃保存,即使在-80℃保存,全血中的RNA也容易发生降解。传统的提取新鲜全血RNA方法是把先把有核细胞从全血中分离出来,需要加白细胞分离液、离心等步骤,比较繁琐,在临床医院往往难以实施。作为RNA提取的领先公司,05年国内首家研发成功液体样本RNA提取试剂RN01 TRIpure LS(LS 意思是Liquid Sample)可以直接裂解全血提取RNA,避免了先裂解白细胞可能导致的RNA降解,也大大简化了操作步骤。操作时间比普通方法节约至少三分之一。
在临床上采血时,可以先把TRIpure LS Reagent分装750ul到1.5ml的离心管中。血液样本可以先抗凝处理(EDTA抗凝或者其他抗凝方式都可),然后取250ul全血样品加入到750ul的TRI pure LS Reagent中,用移液器反复抽打并振荡混匀,在室温裂解5min-10min,直至血细胞充分发生裂解。然后可把此裂解液保存在-20℃下可达2个月,-80℃可达半年。在此期间,可以把该裂解液进行RNA的抽提,运输过程可以4℃ 1天,-20℃ 一周。
在全血RNA提取试剂直接裂解全血的基础上面,增加了离心柱操作,推出了RN23 RNAliquid 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒。经过离心柱子吸附漂洗,除了进一步简化了操作步骤外,更适合临床高通量操作外, 还极大的提高了RNA的纯度。除了一般常见的RT PCR 或者荧光定量PCR外,RNA纯度可以满足最严格的实验要求比如基因表达谱芯片要求, 1ml的全血可以得到10μg左右的total RNA,足够满足芯片分析的需要。
TRIpure LS Reagent (液体样本RNA抽提试剂)
目录号:1102
货号# | 规格 |
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110201 | 50 ml |
110202 | 100 ml |
产品介绍:
TRIpure LS Reagent试剂是直接从来源于人,动植物,酵母,细菌和病毒的液体样品中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用。