产品简介。
Omifection-R 是一款专门用于 siRNA 转染的试剂,转染效率高,细胞毒性低,在多种细胞系及原 代细胞中都表现出良好的转染效果。
特点与优势。
1. 转染效率高。本产品与 Lipofectamine 2000 或 RNAi Max 等转染试剂的转染效率类似。 2. 细胞毒性低。本产品在多种细胞系和原代细胞的 siRNA 转染实验中没有表现出细胞毒性。 3. 使用方便。本产品不受血清和抗生素的影响,转染前不用更换细胞培养液。
使用说明。
1. 以 6 孔细胞培养板培养的贴壁细胞为实验体系,转染实验流程如下: 2. 细胞培养。胰酶消化法收集细胞并计数,接种到 6 孔细胞培养板,培养 24 h 后细胞密度达到 30%-70%。(细胞密度太大不利于转染) 3. siRNA 制备。利用 RNase-free ddH2O 溶解 siRNA 干粉,终浓度为 20 μM,即利用 125 μL 的 RNase-free ddH2O 溶解 1 OD(33 μg 或 2.5 nM)siRNA 干粉,震荡(Vortex)使其溶解。 4. 转染复合体制备。准备 2 个无菌 EP 管,各加入 100 μL OPTI-MEM 培养液 (Gibco),其中一管 加入 4 μL Omifection-R,混合 10 次,室温静置 5 min。另外一管加入 6 μL siRNA(20 μM)溶液, 混匀。将 Omifection-R 混合液滴加到 siRNA 混合液中,混匀,室温静置 30 min(15-30 min,但 孵育 30 min 转染效果更好),制备转染复合体。 5. 细胞转染。将转染复合体滴加入细胞培养液中,轻摇混匀,转入 CO2 培养箱中继续培养。 6. 换液。转染 6-12 h,更换成新鲜的细胞培养液。若无明显细胞毒性,也可不用换液。 7. 转染 24-36 h,利用 QPCR 检测目的基因 mRNA 表达水平,或利用 Western blot 检测目的蛋白表 达水平。bio-equip.com
北京奥秘佳得医药科技有限公司是一家生物医药高新技术企业,具有先进的药物研发平台和锐意创新的技术团队,主要致力于生物和化学高新药物的研发与生产。同时,凭借完善的生物实验平台和专业的技术团队。目前,公司在细胞外囊泡研究领域取得了显著成果,研发了以磁珠为分离介质的外泌体纯化试剂盒和慢病毒纯化试剂盒,建立了一套高效的外泌体和慢病毒纯化技术,为二者的大规模分离纯化及临床研究提供了有效地技术保障