慢病毒滴度快速检测卡

本产品是以胶体金免疫层析技术为基础，通过快速检测慢病毒和假病毒外壳上的 P24 蛋 白来确定病毒滴度的检测卡。本检测卡由样品窗（S）、质控线（C）和检测线（T）三部分组 成。待测样品滴加到样品窗（S）中后，样品中的 P24 蛋白首先与胶垫上的胶体金标记的 P24 鼠单克隆抗体结合形成复合体，通过毛细电泳作用泳向检测线和质控线，到达检测线，被检 测线上的另外一种 P24 鼠单克隆抗体识别并捕获。随着被捕获的复合体的堆积，检测线呈现 出酒红色。当复合体继续向前泳动到质控线时，P24 鼠单克隆抗体被质控线上的胶体金标记 的羊抗鼠多克隆抗体捕获，质控线呈现出酒红色。通过判读检测线和质控线是否显色，即可 判断样品中是否存在 P24 蛋白。P24 蛋白浓度与检测线颜色的深浅呈正相关，通过与比色卡 （图 1）对比，即可定量检出样品中的 P24 蛋白浓度，进而大致估算出慢病毒滴度。 
检测卡用途：
1. 评估基于 HIV-1 的慢病毒或假病毒包装效率。
2. 估算基于 HIV-1 的慢病毒或假病毒滴度。
特点与优势。
1. 本产品操作简便，可快速检测慢病毒或假病毒的滴度。
2. 使用少量样品即可初步评估慢病毒包装效率。 
使用说明
1. 打开包装，取出检测卡，平放在生物安全柜中。 2. 用移液器吸取 80 μl 含有慢病毒的细胞培养上清或纯化慢病毒溶液，加入样品窗 S 中。 3. 室温静置 10-15 min，判读结果。（15 min 读取效果最佳，20 min 内完成结果判读。） 4. 结果判读： 1) 质控线（C）不显色，无论检测线（T）是否显色，检测结果均无效。 2) 质控线（C）和检测线（T）均显色，为阳性，即样品中含有慢病毒或假病毒。 3) 质控线（C）显色，检测线（T）显色达到最深条带，用 PBS 适当稀释（100 倍或 50 倍稀释），重新检测。 4) 质控线（C）显色，检测线（T）不显色，检测结果为阴性，即不含慢病毒。 5) 慢病毒滴度评估。比对检测卡中检测线的颜色与图 1 中色谱条带颜色深浅，根据表 1 中所列出的 P24 蛋白浓度与慢病毒滴度之间的关系，大致估算出样品中的慢病毒滴度。
慢病毒滴度估算原理：
1. 一个慢病毒颗粒（Lentiviral Particle, LP）中约有 2000 个 P24 蛋白分子，用以下公式可 以计算慢病毒的颗粒数（LP）。 2. 一个 LP 相当于：2000×24×103 /(6×1023) g of P24 = 8×10-5 pg P24；或者说 1 ng P24=1.25×107 LPs（≈1.25×104-5 TU）。 3. 正常情况下，每 100-1000 LPs 中会有 1 个具有感染活性的病毒载体，即 1 TU （Transducing Unit）。 4. 上述公式计算得到的 LP 值是理论值，检测样品中游离的 P24 蛋白可能会使该值偏 高。 5. 本产品是半定量检测卡，数据仅供参考。
 

北京奥秘佳得医药科技有限公司是一家生物医药高新技术企业，具有先进的药物研发平台和锐意创新的技术团队，主要致力于生物和化学高新药物的研发与生产。同时，凭借完善的生物实验平台和专业的技术团队。目前，公司在细胞外囊泡研究领域取得了显著成果，研发了以磁珠为分离介质的外泌体纯化试剂盒和慢病毒纯化试剂盒，建立了一套高效的外泌体和慢病毒纯化技术，为二者的大规模分离纯化及临床研究提供了有效地技术保障