慢病毒包装试剂盒

本产品包括慢病毒包装质粒（Lenti-Mix）、阳性对照质粒（lenti-GFP）、质粒 DNA 转染试剂 （Omifection）和病毒感染增强试剂（Polybrene），其中包装质粒能够与已经构建的慢病毒骨架质粒 联合，生产高滴度的慢病毒。 
1. 本试剂盒中的包装质粒能够与多家公司提供的慢病毒骨架质粒配合，生产高滴度的慢病毒。 2. 本试剂盒中的转染试剂 Omifection，可以转染分子量较大的慢病毒质粒，保证转染效率，提高 病毒产量。
1) 细胞培养。293T 细胞传代接种于细胞培养皿（Φ 100 mm），置于 37 ℃，5% CO2培养箱中 培养，24 h 后细胞密度达到 60%～80%。（细胞密度不宜过大，否则影响转染效率） 2) 转染。向 Lenti-Mix 中加入 1 mL OPTI-MEM 培养液，再加入 9 μg 慢病毒骨架质粒（目的 蛋白过表达或 RNAi 质粒，或一管 GFP 对照质粒），混匀，加入 54 μL 转染试剂 Omifection， 混合 10 次，室温静置 30 min，滴加入细胞培养液中，轻轻摇匀。 3) 换液。转染 6-12 h，更换成新鲜的细胞培养液，继续培养。 4) 慢病毒收集。转染 48 h，收集第一批含有慢病毒的细胞培养上清（暂时置于 4 ℃保存）， 5) 293T 细胞中再加入 10 ml 新鲜的细胞培养液，24-48 h 后，收集第二批含有慢病毒的细胞培 养上清（第二批细胞培养上清中的慢病毒滴度高于第一批）。 6) 离心。含有慢病毒的细胞培养上清转入离心机，3,000 rpm（离心力为 870 g），4 ℃离心 5 min， 弃沉淀，上清转入新的无菌离心管，即是含有慢病毒的细胞培养上清。 7) 用慢病毒滴度检测卡测定慢病毒滴度或利用本公司的慢病毒纯化试剂盒（Cat：OmL-02） 纯化慢病毒。 8) 含有慢病毒的细胞培养上清可在 4 ℃保存 1 个月，长期保存应置于-80 ℃，但冻融一次，病 毒感染效果降低 30-50%。

北京奥秘佳得医药科技有限公司是一家生物医药高新技术企业，具有先进的药物研发平台和锐意创新的技术团队，主要致力于生物和化学高新药物的研发与生产。同时，凭借完善的生物实验平台和专业的技术团队。目前，公司在细胞外囊泡研究领域取得了显著成果，研发了以磁珠为分离介质的外泌体纯化试剂盒和慢病毒纯化试剂盒，建立了一套高效的外泌体和慢病毒纯化技术，为二者的大规模分离纯化及临床研究提供了有效地技术保障