GR HiFi DNA Polymerase-P
产品规格
组分 |
货号 |
规格 |
价格 |
GR HiFi DNA Polymerase-P ReadyMix(2x) |
#GR-P001 |
1ml |
¥405 |
GR HiFi DNA Polymerase-P ReadyMix(2x) |
#GR-P002 |
5ml |
¥1640 |
产品说明
GR HiFi DNA Polymerase-P聚合酶是由鼓润公司独家研发优化的新一代高保真DNA聚合酶。经过工程改造后该酶对DNA的亲和力增加,不需要辅助蛋白或DNA结合域。该酶固有的高持续合成能力可显著提高合成产量、速度和灵敏度。此外,该酶扩增长片段以及富含GC和AT片段的能力显著提高。GR HiFi DNA Polymerase-P ReadyMix(2x)包含GR HiFi DNA Polymerase-P聚合酶、dNTPs以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,减少了移液操作,提高了检测通量和结果的重现性。体系中加入的保护剂使得2 × Ready mix经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。本产品可应用于NGS文库扩增反应、常规测序的PCR(直接测序或者克隆PCR产物的测序)扩增反应、质粒构建、定点突变等。
存储条件:-20℃储存(避免反复冻融)
实验流程
反应体系
所有操作请在冰上进行,各组分解冻后请充分混匀,用完之后请及时放回-20℃保存。
准备如下反应体系(该反应体系可根据需要进行放大):
组分 |
体积 |
ddH2O |
up to 50 μl |
GR HiFi DNA Polymerase-P ReadyMix(2x) |
25 μl |
上游引物 (10 μM) |
2 μl |
下游引物 (10 μM) |
2 μl |
模板DNA* |
x μl |
*不同模板最佳反应浓度有所不同,需根据需求自行摸索最佳浓度。
反应程序
循环步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
预变性 |
95°C |
3min |
1 |
变性 |
95°C |
15sec |
15-35 |
退火a |
60-75°C |
15sec |
延伸b |
72°C |
30-60sec/kb |
终延伸 |
72°C |
1min/kb |
1 |
a : 请根据引物Tm值设置退火温度。如果需要,可以建立一个温度梯度寻找引物与模板结合的最适温度。此外,退火温度直接决定扩增特异性。如发现扩增特异性差,可适当提高退火温度。
b : 适当延长延伸时间有助于扩增产量的提高。