1.
产品介绍
Seplife LH-20层析介质以葡聚糖G-25为基质,经羟丙基化所得,集凝胶过滤、分配层析和吸附层析于一体。Seplife LH-20层析介质适用于亲脂性小分子化合物的纯化,能将结构性能非常相近的有机物进行分离,即可用于初步纯化步骤,也可用与最终精制步骤,如单体纯化或非对映同分异构体的分离,尤其适合中草药中具有生理活性有效成分的分离,如多酚类黄酮、胆固醇、脂肪酸、激素、维生素等。
2.性能介绍
产品牌号 |
Seplife LH-20 |
外观 |
白色球状,无臭无味 |
粒径(干,μm) |
18~111 |
排阻极限 |
1~5KD(球蛋白) |
尺寸排阻模式 |
小于总体积的20% |
正相分配模式 |
小于总体积的1% |
最大流速(cm/h) |
480 |
pH稳定性 |
2~13(短期[CIP]),3~10(长期)
|
操作温度 |
4~40℃ |
化学稳定性 |
在常用的水相溶剂和有机溶剂中稳定 |
应用 |
适合中草药中具有生理活性有效成分的分离,如多酚类黄酮、胆固醇等
|
3.使用方法
3.1预处理
(1)在室温下,将凝胶溶胀于层析溶剂中至少3小时,溶胀后胶体积的大小决定于所使用的溶剂体系,请参考凝胶溶胀表,计算特定柱体积所需要干胶的量。在溶胀的过程中,要尽量避免过分搅拌,否则会破坏球形胶粒,且要避免使用磁力搅拌器。
(2)使溶胀的凝胶体积沉淀之后占总体积的75%,上层溶剂占25%,这时,悬浮液从一个容器倒入另一个容器时胶粒可移动。
凝胶溶胀表
序号 |
溶剂 |
溶胀后的体积
(ml/g干凝胶) |
溶剂吸收率
(ml/g干凝胶) |
1 |
二甲基亚砜 |
4.4~4.6 |
— |
2 |
吡啶 |
4.2~4.4 |
— |
3 |
水 |
4.0~4.4 |
2.1 |
4 |
二甲基二甲酰胺 |
4.0~4.4 |
2.2 |
5 |
甲醇 |
3.9~4.3 |
1.9 |
6 |
氯仿 |
3.8~4.1 |
1.8 |
7 |
丙醇 |
3.7~4.0 |
— |
8 |
乙醇 |
3.6~3.9 |
1.8 |
9 |
丁醇 |
3.5~3.8 |
1.6 |
10 |
四氢呋喃 |
3.3~3.6 |
1.4 |
11 |
二氧六环 |
3.2~3.5 |
1.4 |
12 |
丙酮 |
2.4~2.6 |
0.8 |
13 |
四氯化碳 |
1.8~2.2 |
— |
14 |
苯 |
1.6~2.0 |
— |
15 |
乙酸乙酯 |
1.6~2.0 |
0.4 |
16 |
甲苯 |
1.5~1.6 |
0.2 |
3.2装柱
装柱按照标准操作规程操作。必须保证每种材料都处于工作温度,凝胶装柱前需要脱气。
3.3平衡
使用2~5倍柱床体积的上样平衡液平衡柱子,务必使流出液的电导和pH同上样缓冲液的电导和pH完全一致。如改变溶剂应该注意凝胶在新溶剂中的溶胀性质,并根据性质确定柱高调节器的位置,如使用相同的溶剂,在以后的层析中柱平衡可以省略。(为了延长层析柱的使用寿命,所有的缓冲液都应该离心或经过0.45um的膜过滤以除去杂质。)
3.4上样
上样体积控制在1-2%的柱床体积,样品中如有杂质或沉淀应该在上样前过滤或离心除去。
3.5洗脱
洗脱流速应根据情况而定。总体来说,较低的流速,具有较高的分辨率。Seplife LH-20 洗脱溶剂分为两类:反相和正相两种。使用最多的是反相溶剂洗脱,以甲醇--水系统最为常见,先用水,逐渐增加甲醇比例,最后用100%甲醇冲柱。正相系统以氯仿--甲醇最为常见,先用50%氯仿--甲醇,逐渐增加甲醇比例,最后用100%甲醇冲柱。 如果样品极性大,选用反相溶剂洗脱(甲醇--水),样品用最少体积的甲醇-水(尽可能甲醇少一些)溶解,过滤后,湿法上样。如果样品极性小,选用正相溶剂洗脱(氯仿-甲醇),样品用最少体积的氯仿-甲醇溶解,过滤后,湿法上样。
3.6再生
Seplife LH-20柱子被弄脏,大多数情况下是由于样品没过滤,导致柱头堵住,或由于样品的死吸附(一般很少发生),使柱子的柱头部分污染,一般的处理是将被污染的柱头部分的填料弃去。具体做法很简单,只将被污染的柱头部分的填料用玻璃棒轻轻搅起,倒掉即可。如果柱子整个被污染且是反相被污染,则依次用水,NaOH-NaCl水溶液(8g NaOH ,30g NaCl,1000ml水),水,甲醇洗涤被污染的柱子。由于是整个柱子被污染,所以污染物一定不会完全死吸附在柱上(如果完全死吸附在柱上,污染物一定会只在柱头部分),所以用合适的溶剂一定可以将之洗下来。
3.7存储
干粉保存在4~30℃,干燥、通风、清洁处;溶胀后的介质保存在4~8℃,20%乙醇溶液中,避免与氧化剂接触,不可冷冻。
3.8运输
运输中避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。
4.
注意事项
(1)样品必须澄清没有颗粒。
(2)所装的柱床必须表面平整,无沟流及气泡,否则应重装。
(3)洗脱过程中应严格控制流速,且勿过快。
(4)加样及整个洗脱过程中,严防柱面变干。
(5)本品应避免与氧化剂接触,避免长时间暴露在空气中。
5.
订货信息
产品牌号 |
货号 |
包装规格 |
Seplife LH-20 |
D6007610 |
25g |
D6007611 |
100g |
D6007612 |
500g |
D6007613 |
1kg |
D6007614 |
5kg |
D6007615 |
10kg |
生产日期:见标签
使用期限:在适当的贮藏条件下可贮藏5年
注册人名称/生产企业:西安蓝晓科技新材料股份有限公司
注册人住址/生产地址:西安市高新开发区锦业路135号蓝晓科技园
售后服务单位:西安蓝晓科技新材料股份有限公司
邮政编码:710076
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