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M5011 Magic MultiS One Step Cloning kit
英文名称:总访问:261
国产/进口:国产半年访问:11
产地/品牌:麦伯产品类别:分子生物学试剂
规       格:M5011 最后更新:2024-10-9
货       号:M5011
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销售商: 杭州沃森生物技术有限公司 查看该公司所有产品 >>
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产品简介

传统的基于限制性内切酶和T4 DNA连接酶的经典分子克隆技术,易出现假阳性,克隆效率不高,还会受到酶切位点的选择、插入片段制备繁琐、T4 DNA连接酶序列的偏好性、连接反应时间长等多种实验因素的限制。

无缝克隆技术不依赖于 T4 连接酶,不受载体和目的片段的酶切位点限制,采用重叠片段重组的方法,特殊的酶组合可以将任意方法线性化后的载体和与其两端具有 15-25bp重叠区域的 PCR 片段定向重组连接, 快速实现一个或多个片段的高效无缝克隆。

Magic MultiS One Step Cloning kit采用一管式mix形式,只需要一步重组法,即可得到高效率克隆的重组载体,大大提高克隆工作效率。

产品特点

1. 30分钟可以将一个或多个PCR扩增片段(平端)克隆插入任意载体的任意位置。

2. 不受载体和插入片段酶切位点的可用性和平端/粘性末端的限制,可以在任意位点进行克隆。

3. 无缝克隆,插入点不会引入不需要的碱基序列。

4. 不依赖于连接酶及磷酸酶,高效,准确,克隆阳性率可达95%以上。

5. 室温孵育即可完成片段的连接

                                          

单片段及多片段重组产物转化后,平板上均可产生较多单克隆,无插入片段的阴性对照版上几乎无克隆产生

单片段转化板挑取20个单克隆进行菌落PCR,克隆阳性率达95%以上

4片段重组转化板挑取15个单克隆进行菌落PCR,克隆阳性率达85%以上

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