本产品是海星生物专为骨髓间充质干细胞研制优化的成脂诱导分化培养基试剂盒,用于增强成人骨髓间充质干细胞向成脂细胞方向诱导分化的能力。在库产品均通过生物安全检测和产品质量检测,体系稳定有效,现货发送,性价比高。海星生物专业的研发团队可提供最有效的技术指导,保证售后品质。
名称 |
规格 |
货号 |
价格 |
HyCyte™ 成人骨髓间充质干细胞成脂诱导分化培养基 |
400mL |
BMHX-D102 |
1690 |
200mL即用型 |
BMHX-D102R |
1090 |
HyCyte™ SD大鼠骨髓间充质干细胞成脂诱导分化培养基 |
400mL |
BMRS-D102 |
1690 |
200mL即用型 |
BMRS-D102R |
1090 |
HyCyte™ C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞成脂诱导分化培养基 |
400mL |
BMMC-D102 |
1690 |
200mL即用型 |
BMMC-D102R |
1090 |
|使用说明
1.成脂诱导分化操作
1.1接种干细胞
取对数生长期的细胞,按照2.0×10e4cells/cm2的细胞密度接种至培养器皿,于37℃,
5% CO2培养环境下培养至汇合度90~100%,弃掉上清,加入成脂诱导分化培养基诱导液。
NOTE:如细胞贴壁性较差,建议使用0.1%明胶对培养底面进行包被。
1.2细胞分化诱导
于37℃,5% CO2培养环境下培养约3天,更换为成脂诱导分化培养基维持液,培养1天后,再更换为成脂诱导分化培养基诱导液,继续培养
3天。
按照以上换液频率诱导14~21天,并注意观察细胞形态变化。根据细胞诱导形成的脂滴数量和大小,决定终止细胞诱导的时间,并进行染色鉴定。
2.染色鉴定
2.1细胞固定
吸去培养基使用适量1×PBS清洗一次,弃去后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面,室温固定30~60min,弃去固定液再使用1×PBS清洗两次。
2.2油红O染色
取生理盐水或1×PBS与油红O原液配制油红
O工作液(油红O原液:生理盐水=3:2),现用现配。配制后可对油红O工作液进行离心,以沉淀染色液中的过饱和析出物。向清洗干净的诱导孔内加入适量油红O工作液,静置染色30min。吸走油红O工作液,用1×PBS清洗两次,并加入适量1×PBS避免细胞干燥。
2.3诱导评估
显微镜下观察成脂染色效果,并进行图像采集和诱导评估。诱导成功时,脂滴与油红O染料结合后呈现红色或橘红色。
NOTE:干细胞的成脂分化水平因细胞类型、细胞供体来源,培养条件、细胞代次、细胞状态和分化时间等因素而异。
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