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B6.Cg-Mapttm1(EGFP)Klt Tg(MAPT)8cPdav/J
品系货号：005491 ｜ 通用名称：htau 小鼠
htau 小鼠不表达内源性微管相关蛋白 tau (microtubule-associated protein tau, Mapt) 基因，但可表达人 MAPT 的所有六种异构体（包括 3R 和 4R 型）。此突变小鼠适合用于研究人 MAPT 与阿尔兹海默症发病机理之间的关系。
品系特点
同源的
靶向突变
转基因
其他使用限制
品系捐赠者
Peter Davies， 阿尔伯特·爱因斯坦医学院Karen Duff，Nathan Kline 研究所
Peter Davies， 阿尔伯特·爱因斯坦医学院Karen Duff，Nathan Kline 研究所
品系详情
htau 小鼠具有 EGFP 序列以及可破坏微管相关蛋白 tau (Mapt) 基因外显子 1 的 neo 基因结构。此外，此品系小鼠还含有编码人 MAPT 基因的转基因。
MAPT 基因可编码一种蛋白，该蛋白能参与调节微管的组装和稳定性以及神经元轴突极性。基因选择性剪接能够生成数种长度不同的异构体。该基因的突变与额颞叶痴呆伴帕金森综合征、进行性核上性麻痹、皮克病、帕金森病和阿尔兹海默症相关。
在这些 htau 小鼠中，人 MAPT 的所有六种异构体（包括 3R 和 4R 型）均有表达，但未检出内源性小鼠 MAPT。通过免疫组化和蛋白质印迹法，可在脑组织裂解物中检测到EGFP。到 3 月龄时，可通过 EGFP 荧光在细胞体和树突中检测到过度磷酸化的 MAPT。早在 2 月龄时，就可将脑组织中聚集的不溶性 MAPT 以成对螺旋结构的形式分离出来 [Phillips et al.PLoS One May 2011]。
靶向等位基因纯合子小鼠和转基因半合子小鼠可活可育。捐赠者报道称，尚未观察到转基因插入片段纯合子小鼠，推测此类小鼠可能为胚胎致死。
直接观察荧光无法检测到 GFP。
品系建立
Tau KO 小鼠含有靶向突变，该突变将增强型绿色荧光蛋白 (enhanced green fluorescent protein, EGFP) 编码序列和新霉素耐药 (neo) 基因结构插入 Mapt 的第一个外显子，从而破坏 Mapt 基因的表达，并在细胞质中产生与 MAPT 前 31 个氨基酸融合的 EGFP 蛋白（请参见品系货号 004779）。将该质粒电转入源自 129S4/SvJae 的 J1 胚胎干细胞(embryonic stem, ES)，并将正确靶向的 ES 细胞注射到 C57BL/6J 雌鼠的受体囊胚中。
此外，还创建了一段包含 200-250 kb 长度 PAC 插入片段的转基因，该片段包括人 MAPT 基因的编码序列、内含子区域和调控元件。转基因等位基因在 Swiss Webster 雌鼠与 B6D2F1 雄鼠杂交所得胚胎中产生。捐赠者先将 8C 首建品系小鼠与Tau KO 小鼠进行繁育，再将得到的含有两个等位基因的小鼠与 C57BL/6 小鼠杂交九代。小鼠送抵杰克森实验室后，随即冻精保存。建立活体种群时，用等分冷冻精子使 C57BL/6J 卵母细胞受精（品系货号 000664）。
当维持活体种群时，可将靶向突变纯合子和转基因半合子小鼠与靶向突变纯合子和非转基因小鼠进行繁育。捐赠者报道称，尚未观察到转基因插入片段纯合子小鼠，推测此类小鼠可能为胚胎致死。
繁育策略
Mapttm1（EGFP）Klt 纯合子，Tg（MAPT）8cPdav半合子小鼠 X Mapttm1（EGFP）Klt 纯合子，非转基因小鼠或者 Mapttm1（EGFP）Klt 纯合子，非转基因小鼠 X Mapttm1（EGFP）Klt 纯合子，Tg（MAPT）8cPdav半合子小鼠
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