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销售商: 上海诺宁生物科技有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
EZ poly™DNA转染试剂
产品编号 |
产品名称 |
包装规格 |
NBS6326-0.5ml |
EZ poly™DNA转染试剂 |
0.5ml |
NBS6326-1ml |
EZ poly™DNA转染试剂 |
1ml |
NBS6326-5ml |
EZ poly™DNA转染试剂 |
5x1ml |
产品简介:
EZ poly™DNA转染试剂是一款性能优良的DNA转染试剂,可用于质粒DNA的传送。它具有较强的DNA转染能力,与其它转染试剂相比,具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性 好等优点。
应用范围:
EZ poly™DNA转染试剂可适用于众多易转染细胞株的DNA转染、瞬时转染及稳定转染。适用于多种贴壁细胞系,特别适用于各种常规细胞如HeLa、293T、COS7、CHO和B16F10等,均可得到较高的转染效率,且重复性好。
保存条件:
2-8℃保存一年
运输:
常温运输
质粒DNA的转染:
以24孔板为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下:
1 |
细胞接种: 每孔接种0.5~1.0×105个细胞,细胞培养12~24小时,使转染时细胞密度达到60~70%融合度 |
2 |
质粒稀释: 将0.4 µg质粒稀释于Opti-MEM培养基中,终体积10 µL |
3 |
复合物制备: 按比例取适量EZ poly™DNA转染试剂稀释于Opti-MEM培养基中,终体积10 µL,室温孵育5分钟后与质粒稀释液混匀 |
4 |
室温静止20分钟 |
5 |
每孔20 µL复合物加入细胞培养板中,混匀,37℃培养18~48小时后检测基因表达,无需更换培养基 |
质粒DNA的转染优化:
可通过改变细胞密度、DNA浓度以及EZ poly™DNA转染试剂浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,EZ poly™DNA转染试剂(µL):DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整
表1. 不同培养板所需转染试剂和DNA的用量
培养板 |
单孔面积 |
接种 培养基 |
Opti-MEM 稀释后终体积 |
DNA转染 |
|
试剂用量 |
DNA |
||||
96孔板 |
0.3cm2 |
200µL |
2×5µL |
0.4µL |
0.2µg |
24孔板 |
2.0cm2 |
500µL |
2×10µL |
0.8µL |
0.4µg |
12孔板 |
4.0cm2 |
1mL |
2×20µL |
1.6µL |
0.8µg |
6孔板 |
10.0cm2 |
2mL |
2×50µL |
2.0µL |
1.0µg |
60mm |
20.0cm2 |
5mL |
2×0.1mL |
8.0µL |
4.0µg |
100mm |
60.0cm2 |
15mL |
2×0.3mL |
24µL |
12µg |