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EPI300 Chemically Competent Cell
感受态系列/适用于不稳定DNA或毒性基因的克隆，转化效率＞5×10^8cfu/μg
感受态系列/适用于不稳定DNA或毒性基因的克隆，转化效率＞5×10^8cfu/μg
【产品简介】
EPI300菌株基因组整合了突变的trfA基因，在未添加诱导剂情况下，携带有oriV复制⼦的质粒拷⻉数约1-2copies/cell，添加诱导剂L-阿拉伯糖情况下，质粒拷⻉数可增加到约 15~20 copies/cell，因此该菌株特别适⽤于各种不稳定DNA或毒性基因的克隆；缺失核酸内切酶（endA1），提⾼了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型（recA1）减少插⼊⽚段的同源重组概率，保证了插⼊DNA的稳定性；mrr-hsdRMS- mcrBC基因缺陷使得EPI300适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA；φ80dlacZ∆M15使得EPI300可⽤于蓝⽩斑筛选；rpsL赋予该菌株链霉素抗性。
【产品特点】
特别适⽤于各种不稳定DNA或毒性基因的克隆
重组酶缺陷型菌株
转化效率可达5×108 cfu/μg
可⽤于蓝⽩筛选实验
具有链霉素抗性
【基因型】
EPI300菌株基因组整合了突变的trfA基因，在未添加诱导剂情况下，携带有oriV复制⼦的质粒拷⻉数约1-2copies/cell，添加诱导剂L-阿拉伯糖情况下，质粒拷⻉数可增加到约 15~20 copies/cell，因此该菌株特别适⽤于各种不稳定DNA或毒性基因的克隆；缺失核酸内切酶（endA1），提⾼了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型（recA1）减少插⼊⽚段的同源重组概率，保证了插⼊DNA的稳定性；mrr-hsdRMS- mcrBC基因缺陷使得EPI300适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA；φ80dlacZ∆M15使得EPI300可⽤于蓝⽩斑筛选；rpsL赋予该菌株链霉素抗性。
【产品特点】
特别适⽤于各种不稳定DNA或毒性基因的克隆
重组酶缺陷型菌株
转化效率可达5×108 cfu/μg
可⽤于蓝⽩筛选实验
具有链霉素抗性
【基因型】
F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galKλ- rpsL nupG trfA dhfr
【产品组成及保存】
-83~ -78℃保存 6 个⽉。
| 组分 | 规格 |
| EPI300 | 10 ×100 µL |
| pUC19(control vector) | 10 µL(10 pg/µL) |
【操作流程】
加入目的 DNA（质粒或连接产物），轻轻混匀后进行如下步骤：
加入目的 DNA（质粒或连接产物），轻轻混匀后进行如下步骤：
【问题讨论】
Q1：平板为什么会出现杂菌或类似白浆物菌膜？
A1：
1）使用劣质的抗生素，效价过低无法发挥筛选作用；
2）配制平板时，使用抗生素浓度过低；
3）使用长期保存或者保存不当的抗性平板，抗生素失效；
4）培养时间过长。如Amp抗性的平板，若长期在37℃恒温培养，很容易长出卫星菌落或者杂菌；
5）若平板配置后未晾干，则可能长出菌膜；
6）操作过程中平板受到污染，长出具有相同抗性的杂菌。
Q1：平板为什么会出现杂菌或类似白浆物菌膜？
A1：
1）使用劣质的抗生素，效价过低无法发挥筛选作用；
2）配制平板时，使用抗生素浓度过低；
3）使用长期保存或者保存不当的抗性平板，抗生素失效；
4）培养时间过长。如Amp抗性的平板，若长期在37℃恒温培养，很容易长出卫星菌落或者杂菌；
5）若平板配置后未晾干，则可能长出菌膜；
6）操作过程中平板受到污染，长出具有相同抗性的杂菌。
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