JM109 Chemically Competent Cell
感受态系列/更利于克隆DNA的稳定及高纯度质粒DNA的提取,转化效率>5×10^9 cfu/μg
【产品特点】
质粒DNA的产量大和质量高
重组酶缺陷型
转化效率5×109 cfu/μg
可⽤于蓝⽩斑筛选
【基因型】
endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17(rk- mk+) relA1 supE44 Δ(lac-proAB)[F'traD36 proAB+ lacIq ZΔM15]
【产品简介】
JM109 菌株衍⽣于⼤肠杆菌E.coli K菌株,缺失核酸内切酶 (endA1),提⾼了质粒DNA的产量和质量;重组酶缺陷型 (recA1)减少插⼊⽚段的同源重组概率,保证了插⼊DNA的稳定性;hsdR17基因型使得异源DNA不被内源核酸酶系统降解;laqIqZΔM15的存在使得JM109可⽤于蓝⽩斑筛选实验。
【产品组成及保存】
-83~-78℃保存6个月。
组分 |
规格 |
JM109 |
10 ×100 µL |
pUC19(control vector) |
10 µL(10 pg/µL) |
【操作流程】
加入目的 DNA(质粒或连接产物),轻轻混匀后进行如下步骤:
【问题讨论】
Q1:为什么感受态需要在-83~-78℃条件保存,不能存于-20℃吗?
A1:感受态细胞受到过电击或者氯化钙氯化铯等的处理,细胞壁以及细胞膜都有损伤,此种状态下的细胞十分脆弱,如果在-20℃,在细胞内部液化度较高的情况下,由于细胞流动性的原因造成不可逆损伤,甚至死亡。
Q2:可以将感受态细胞存储在液氮中吗?
A2:不建议将感受态细胞长期于液氮中保存,若长期保存,极端温度会损害细胞。但可将感受态在制备后于液氮中进行速冻处理。