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T5 Direct PCR kit（PAGE）

英文名称：	T5 Direct PCR kit（PAGE）	总访问：	293
国产/进口：	国产	半年访问：	10
产地/品牌：	擎科生物	产品类别：	分子生物学试剂
规格：	TSE007	最后更新：	2024-3-28
货号：
CAS 号：
参考报价：	1299元/5×1.0 mL
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销售商：北京擎科生物科技有限公司

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产品介绍
公司简介

T5 Direct PCR kit（PAGE）
PAGE检测专用的直接扩增，高保真度，极速延伸（10s/kb）

【产品简介】
本产品为T5 Direct PCR Kit（Plant）的PAGE版。样品可直接用作模板而无需提取DNA，包括新鲜植物样品、2~8℃或冷冻保存的植物材料均可作为模板。
针对植物模板优化的T5 DNA聚合酶具有快速扩增及耐受抑制物的能力，特别添加特异性增强因子SuperPrime及延伸增强因子Extension Enhancer，扩增产量与特异性均显著提高，优化的反应缓冲液可减少扩增条件探索，极大地节省时间。本产品为2×浓度的PCR直扩预混液，已包含合适浓度的Mg²⁺、DNA聚合酶和dNTP，使用时只需加模板和引物，并补水至1×浓度即可进行反应。使用本试剂盒扩增的产物为平端。

【产品特点】
无需提取DNA，样本直接扩增
极高扩增效率和抑制物耐受度
高保真度，极速延伸（5~10 s/kb）
植物样本直扩后PAGE检测

【适用范围】
适用于多种植物叶片、种子直扩，PAGE或琼脂糖凝胶检测。

【产品组成及保存】
-25~-15℃保存2年。

组分	规格
2×T5 Direct PCR kit（PAGE）	5×1.0 mL
5×High GC Additive	2×1.0 mL
Lysis Buffer A	2×10 mL
Dilution Buffer B	1×10 mL
Positive Control Primer Mix	1×0.1 mL

【操作流程】

反应体系

	50 µL 体系
2×T5 Direct PCR kit（PAGE）	25 µL
10 μM Primer F	2 µL
10 μM Primer R	2 µL
Template DNA	1~3 µL
ddH₂O	Up to 50 µL

反应程序

		温度	时间	循环次数
1	预变性	98 ℃	3 min	1 cycle
2	变性	98 ℃	10 s	35~40 cycles
	退火	Tm+3 ℃	10 s
	延伸	72 ℃	10~30 s/ kb
3	终延伸	72 ℃	3~5 min	1 cycle

【实例分享】
直接以水稻叶片为模板扩增，并用 PAGE 检测，背景干净清晰。

【问题讨论】
Q1：经 Lysis Buffer A 裂解处理后的样品上清液可用 Nano Drop 或琼脂糖电泳检测 DNA 浓度吗？
A1：不可以。使用 Lysis Buffer A 裂解后的产物中的成分比较复杂，含有很多杂质，而且释放出的 DNA 浓度极低，无法达到Nano Drop 或琼脂糖电泳等方法检测的最低标准，故不推荐检测，直接扩增即可。

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