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| 销售商： 北京擎科生物科技有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
RNAprep Pure多糖多酚植物总RNA提取试剂盒（离心柱型）
【产品简介】
本试剂盒可从植物组织，尤其是富含多糖多酚或淀粉的植物组织（如棉花叶片、成熟水稻叶片、拟南芥种子、白松松针、香蕉、枇杷叶片、马铃薯块茎、苹果、梨、西瓜果肉、猕猴桃、月季、烟草、沙棘、百合等）中快速提取总RNA，可同时处理大量不同样品。提取的总RNA纯度高，无基因组、蛋白和其它杂质的污染，可用于RT-PCR、Real Time RT-PCR、芯片分析、Northern Blot、Dot Blot、Poly A筛选、体外翻译、RNase保护分析和分子克隆等多种下游实验。
【产品特点】
安全低毒：无需使用酚氯仿等有机试剂，环境友好；
纯度高、完整性好：高纯度RNA可直接用于高纯度要求的下游实验；
操作简便：仅需30-40 min；
高效去除基因组：配有高效DNase I，高效去除基因组污染；
有效去除其他杂质：配有过滤柱。
【适用范围】
植物组织，特别针对富含多糖多酚或淀粉的难提植物组织，如棉花叶片，成熟水稻叶片，拟南芥种子，白松松针，香蕉，枇杷叶片，马铃薯块茎，苹果，梨，西瓜果肉，猕猴桃，月季，烟草，沙棘，百合等。
【产品组成及保存】
| 产品组成 | TSP412（50 次） | 储存条件及稳定性 |
| 裂解液 SL(Buffer SL) | 30mL | 15~25℃,，加入 β-疏基乙醇后4℃保存一个月 |
| 去蛋白液 RW1(Buffer RW1) | 40 mL | 15~25℃ |
| 漂洗液 RW(Buffer RW) | 12 mL | 15~25℃ |
| 无 RNA 酶双蒸水 (RNase-Free ddH2O) | 15 mL | 15~25℃ |
| RNase-Free 吸附柱 CR3( 含 2 mL 收集管 ) (RNase-Free Columns CR3 set) |
50 个 | 15~25℃ |
| RNase-Free 过滤柱 CS( 含 2 mL 收集管 ) (RNase-Free Columns CS set) |
50 ×2个 | 15~25℃ |
| RNase-Free DNase I (1500 U) | 1支 | 4℃ |
| RDD 缓冲液 (DNA 消化缓冲液 ) (Buffer RDD(DNA Digest Buffer)) | 4 mL | 4℃ |
| 无 RNA 酶双蒸水 (RNase-Free ddH2O) | 1 mL | 4℃ |
| RNase-Free 离心管 (1.5 mL) (RNase-Free Centrifuge Tubes (1.5 mL) |
50 个 | 15~25 ℃ |
【注意事项】
预防RNase污染，应注意以下几方面：
1、经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌、汗液及RNase等，可能导致RNA降解。
2、使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3、RNA在裂解液SL中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。
4、配制溶液应使用RNase-Free ddH2O。(将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%(V/V)，混匀后放置过夜，高压灭菌。)
使用前应注意以下几方面：
1、操作前在SL中加入β-巯基乙醇(自备)至终浓度5%，如475 μL SL中加入25 μLβ-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的SL 4'C可放置一个月，裂解液SL在储存时可能会形成沉淀，若有沉淀出现，请加热溶解后使用。
2、第一次使用前应在漂洗液RW中加入无水乙醇，加入量参见瓶上标签。
DNase I储存液的配制
将DNase 1干粉(1500 U)溶解在550 μL RNase-Free ddH2O中，轻柔混匀，分装后-20°C贮存(可保存9个月)。
(注意：从-20°C融化后的DNase 1储存液保存于4℃(可保存6周，切勿再次冻存)
【操作流程】
【问题讨论】
Q1：为什么多糖多酚类的植物RNA难提取？
A1：富含酚类的材料经破碎处理后，酚类物质被释放出来，被氧化后处理液变成褐色，氧化程度越重颜色越深（褐化效应）。被氧化的酚类与RNA不可逆结合，导致RNA丧失活性。用酚氯仿抽提时，RNA会丢失或形成不溶性复合物，从而严重影响RNA的分离纯化。
多糖许多理化性质与RNA很相似，因此较难将两者分开。在除去多糖的同时，RNA也容易被一起去除，使RNA得率降低；沉淀RNA时，也容易产生难溶于水的多糖凝胶状沉淀，或溶解后产生黏稠状溶液，也难有效地分离。多糖还会抑制许多酶的活性，污染了多糖的RNA样品也不适合下游的分子生物学研究。
RNAprep Pure多糖多酚植物总RNA提取试剂盒有效地解决了上述问题，提取的RNA纯度高，浓度好。
【实例分享】
广泛适用于各种富含多糖多酚或淀粉的难提植物组织，提取的RNA含量高、完整性好、纯度高、无gDNA残留。6种多糖多酚植物样品RNA提取效果电泳鉴定图：
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