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| 销售商： 上海雅吉生物科技有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
- 介绍： 基 因 型endA1 sbcBC recBC galK met thi-1 bioT hsdR (Strr)简 要 说 明BJ5183是一种具有较高重组活力的大肠杆菌菌株，是目前腺病毒系统最常用的感受态细胞。BJ5183菌株含有sbcBC recBC双重突变，赋予BJ5183细胞较强的重组能力，有利于转入的目的基因与腺病毒质粒{pAdeasy-1[encodes the Adenovirus-5 genome (E1/E3 deleted)]或pAdeasy-2[encodes the Adenovirus-5 genome (E1/E3/E4 deleted)]}的重组。endA1（缺失核酸内切酶）的突变有利于重组DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。Strr 赋予BJ5183菌株链霉素抗性。BJ5183感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>5×108 cfu/μg DNA。
- 操 作 说 明
- 1.BJ5183感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的质粒（含有目标基因并线性化）和腺病毒质粒，并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
- 2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
- 3.向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
- 4.5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
- 5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
- 注 意 事 项
- 1.感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
- 2.混入目的DNA时应轻柔操作。
- 3.BJ5183菌株的质粒产量不高。腺病毒构建成功后，可选择在其他大肠杆菌菌株中扩繁，纯化质粒。
- 4.BJ5183感受态细胞对温度敏感，应储存在-80℃超低温冰箱，避免温度波动，温度波动会降低感受态转化效率。
- 储存条件： -80℃
- 用途： 克隆感受态细胞
- 注意：部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，仅供客户参考交流研究之用。
试剂盒售后：本公司出售的试剂盒均保质保量，质量问题均可免费退换，另提供免费代测服务。
细胞售后：
1. 细胞运输丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；
3. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照，未告知的视为产品合格。4-10天内出现问题，请提供细胞照片和细胞出现问题的照片以及细胞相关操作的详细步骤，并跟我公司人员及时沟通判定是否重发，具体可以参照我官网或者随货说明书相关售后条款。
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手机版：BJ5183 感受态细胞
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