氢氧自由基(OH-)是化学性质最活泼的活性氧,它几乎与细胞内的每一类有机物如糖、氨基酸、磷脂、核苷酸和有机酸等都能反应,并且有非常高的速度常数,因此它的破坏性极强,但它可以被过氧化氢酶分解,因而测定过氧化氢酶的高低就有其重要意义。
红细胞或组织中过氧化氢酶(CAT)在一定条件下能直接分解其底物过氧化氢(H2O2),使H2O2在反应液中的浓度逐渐降低,相应的吸光度也逐渐下降。
所需仪器及自备试剂:
1、紫外分光光度计(比色测定波长为240nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为25℃)
3、漩涡混匀器
4、微量移液器
操作流程:
1、20μl样本加底物溶液3ml,240nm处测OD1
2、1分钟后240nm处测OD2
3、根据说明书计算公式得出CAT活力
注:最佳取样量(具体摸索的方法按照试剂盒中说明书要求)
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