特别提示:包括微量DNA柱式吸附清除试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:微量DNA柱式吸附清除试剂盒
产品货号:ALH432
产品规格:50次
任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留,对于一些敏感的下游实验,需要去除微量的DNA残留,本试剂盒可直接在离心吸附柱上面消化残留的DNA,然后纯净RNA可以洗脱下来直接使用。本产品兼容所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒。
试剂盒特点:
- 简单快速,条件经过优化,一般15分钟可以消化清除硅胶膜上残留DNA。
- 确保RNase free,可以保证RNA分子完整性。
- 兼容性广,可整合进所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒柱上消化,不需要提取到总RNA后再单独去除里面的残留DNA。
试剂盒组成:
组分 |
规格 |
DNase Buffer |
1.25ml×2 |
RNase-free DNase I |
0.25ml |
去蛋白液RW1 |
40ml |
储存:DNase Buffer -20℃保存,去蛋白液RW1常温或者4℃保存,RNase free DNase-20℃保存,避免反复冻融。
注意事项:
DNase是非常敏感,易物理损坏变性丧失活性,所以不要漩涡混匀DNase I和工作液。轻轻吹打或者上下颠倒混匀混合液。每次在抽提RNA抽提前配置新鲜的工作液。DNase I buffer是和RNase-free DNase I配套专门用于柱上消化,一般的10×DNase buffer并不能用于膜上的DNase消化,不能替代。
操作步骤:
- 按照正常RNA提取步骤操作,裂解混合物过柱离心完全后(RNA包括残留DNA吸附到离心柱硅胶膜上),加入去蛋白液RW1步骤前按照以下步骤操作。
- 取45μl DNase I buffer和5μl RNase free DNase I离心管轻轻吹打混匀成工作液(处理多个离心柱子要按照比例放大制备工作液)。
注:如果残留DNA过多导致消化不完全,可按比例加大使用酶量来提高消化效果(如90μl DNase I buffer和10μl RNase free DNase I)。
- 向吸附柱RA中加入350μl去蛋白液RW1,12,000rpm离心30秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
- 向吸附柱RA中央加入50μl的DNase I工作液,室温(20-30℃)放置15分钟。注意直接将工作液滴在膜中央上,不要让工作液滴在O型圈或是离心柱管壁上。
- 向吸附柱RA中加入350μl去蛋白液RW1,12,000rpm离心30-60秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
- 接漂洗液RW步骤等后续步骤。如果是其它公司试剂盒,则接最后的一个漂洗液漂洗等后续步骤。
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名称:非冻型组织RNA保存液
货号:BTN3060
规格:250mL
本RNA保存液是一种在较高温度下保存RNA样品的非冻型无毒溶液,它能迅速渗入细胞内,通过高效抑制RNase的活性而保存RNA的完整性。
产品特点:
1.操作简单,将组织剪薄浸没在RNA保存液中即可使其RNA不被降解。
2.替代液氮,使样品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱,尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。
3.RNA完整,因本产品能迅速抑制组织中RNA酶的活性,故从中提取的RNA的质量跟液氮保存的样品相比不相上下。
4.方便运输,处理过的样品能在25℃保存一周,使样品邮寄和运输变得容易和便宜,有利学术合作和交流。
5.反复冻融,经本产品处理的样品可反复冻融20次,其间可对样品进行各种处理而不影响最终提取的RNA的质量。
6.结果准确,本产品进入细胞十分快速,基因表达在发生应急改变前就得以锁定,故RNA分析更能反映取样时的真实情况。
7.可比性强,本产品能减少大规模样品处理中的误差,增加各次实验数据间的可比性,对大规模基因表达谱的分析尤其有用。
8.兼容性广,虽然处理过的样品可以使用动物RNA提取试剂盒和TRIzol等试剂提取其RNA,样品还可直接用于组织切片,免疫学和流式细胞分析而不影响RNA提取的质量。
储存条件:常温运输及保存,有效期二年。
使用方法:
一:用本产品保存新鲜组织样品
1.估计完全浸没样品所需要本产品的体积(1g组织需10mL)。
2.标记收集管并加入估计所需量的本产品。
3.以最快速度将样品剪切成厚度小于0.5cm的碎块。
注:鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存,有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
4.将组织碎块完全浸没于收集管的本产品中。
5.将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超过该温度下的最长存放时间,如果要存放在-20℃或-80℃,需先将样品在4℃放置过夜后再转移到最后的温度。注:将样品转移到-20℃或-80℃前,需要倒弃保护液。常见存放温度与其最长存放时间关系为如下:
保存温度 |
时间及效果 |
37℃ |
一天(保存三天的样品RNA有部分降解) |
18-25℃ |
一周(保存两周的样品RNA有轻微降解) |
2-8℃ |
一个月 |
-20℃和-80℃ |
长期 |
6.从存放处取出样品(-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化),用消过毒的镊子将组织碎块从保护液中取出。
7.立即开始RNA提取或进行其他处理(如将样品分割成更小的碎块再重新保存等)。注:样品可以反复冻融二十次而其RNA质量不会受到影响。
二:本产品保存培养细胞、悬浮细胞、细菌和RNA病毒
1.标记收集管。
2.将待样品转移到离心管中,离心收集细胞,弃上清。注:处理含病毒的样品(如血浆)可直接从步骤第4步开始。
3.用冰浴的缓冲液洗一次。
4.将细胞悬浮在少量缓冲液中。
5.加入五到十倍体积的本产品,混均;对病毒样品,加入两到三倍体积的本产品,混均。
6.将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超该温度下的最长存放时间。
如果要存放在-20℃或-80℃,需先在4℃放置过夜后再转移到最后温度条件(将样品转移到-20℃或-80℃前,需要倒弃保护液)。注:样品存放温度与其最长存放时间关系为如下:
保存温度 |
时间及效果 |
37℃ |
一天(保存三天的样品RNA有部分降解) |
18-25℃ |
一周(保存两周的样品RNA有轻微降解) |
2-8℃ |
一个月 |
-20℃和-80℃ |
长期 |
7.取出样品,室温下融化(-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化)。
8.加入一倍体积的预冷的缓冲液(如PBS),用常规离心法收集细胞并用缓冲液洗一次。病毒样品可免去此步骤。
9.细胞直接用于RNA的提取或其他处理。
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