RNA快速纯化试剂盒

特别提示：包括RNA快速纯化试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：RNA快速纯化试剂盒
英文名称：RNA Fast Purification Kit
产品货号：MT0126
产品规格：10T|50T

本试剂盒可在5分钟内快速完成RNA纯化操作，回收率可高达70～95％。该试剂盒采用高特异吸附能力的硅胶吸附柱，应用优化好的特定缓冲液，可选择性地结合回收目标RNA，并去除杂蛋白、盐等。该试剂盒每次可纯化得到高达50μg的RNA片段(>15nt)，回收的产物可直接用于RT-PCR、用于NGS的RNA文库制备、基因编辑、显微注射、RNA标记、转染等。

试剂盒特点：
·用时最短：可在5min内完成RNA的纯化。
·超高纯度：该试剂盒采用高特异性吸附柱式纯化，最大程度的去除蛋白和盐等杂志的污染。
·适用性广：适用于提取获得的RNA、体外合成的RNA、体外合成的sgRNA等多种RNA的纯化。
·操作极简化：只需将样品与Binding Buffer和无水乙醇混合，经一步挂柱和洗脱即可获得高纯度RNA。

RNA纯化流程：


试剂盒组成：
 

组分	10T	50T
RNA Cleanup Binding Buffer	1ml	5ml
RNase-Free H2O	1ml	5ml
吸附柱	10套	50套
Nuclease-Free收集管	10个	50个

储存：室温保存，可保存2年。

应用实例：

应用某品牌的RNA纯化试剂盒和本试剂盒分别纯化体外合成的sgRNA；泳道1和3为纯化前sgRNA，泳道2和4分别为N品牌纯化试剂盒和本试剂盒纯化后的sgRNA。

使用方法：
1．向50μL待回收样品中加入100μL RNA Cleanup Binding Buffer用枪头吹打混合均匀。
注意：若样品不足50μL需加入RNase-Free H₂O补至50μL；若样品大于50μL则可按比例缩放缓冲液体积，当样品大于150μL时应上两根吸附柱。
2．向上述溶液中加入预冷150μL无水乙醇（等体积），枪头吹打混合均匀。（当25nt3．将上述溶液共300μL加入到吸附柱中，室温静置30s。4℃ 13,000rpm离心30s，弃去过柱液。
4．向吸附柱中加入预冷的700μL 75%乙醇，4℃13,000rpm 30s，弃去过柱液，重复此步骤一次。
5．13,000rpm空离2min后，将吸附柱转移至新的1.5ml收集管中，室温放置2min使残留乙醇挥发。
6．向吸附柱芯中加入50~100μL RNase-Free H₂O，室温静置1min后，4℃ 13,000rpm离心2min，获得的产物即为纯化的RNA。可立即使用或于-80℃保存。

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名称：植物RNA提取试剂盒(无酚无lǜ仿柱式提取)
货号：BTN160906
规格：50次
本试剂盒是在柱式植物RNA提取试剂盒(BTN71203)的基础上经过配方和流程优化得到的无lǜ仿升级产品，它结合了植物RNA提取试剂盒的高效性、快捷性以及无lǜ仿处理的安全性。

试剂盒特点：
1. 免酚和lǜ仿处理，操作安全可靠。
2. 简单快速，处理一个样品只需要约十分钟。
3. RNA 纯度更高，平均 OD260/280一般都在2.0左右，能够有效去除大多数植物中的多糖污染。
4. 目前已测试过上百种植物。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
6. 性价比高于进口的柱式植物RNA提取产品。

试剂盒组成：
 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA 洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
1. 估算组织细胞的用量。每次微量提取一般需要100-200mg植物叶片、或50-100mg植物种子、或200-500mg植物果实。
2. 先将新鲜植物组织剪切成小块(保存在RNAhold中的植物组织需用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块)，放入10-15mL塑料离心管中，加入1mL溶液A，然后用匀浆器匀浆5-20秒。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎植物组织，砚磨完后加入1mL溶液A。注意：溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将匀浆物或砚磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。有的植物组织(比如果实)含有大量水份，匀浆液会多于1mL，转移时也只取1mL。
4.室温12000～15000g离心3～5分钟，管底沉淀为细胞破碎物。
5. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中。
6. 加入等体积的溶液B，充分颠倒混匀。如果有沉淀产生(对某些植物，属于正常现象)，千万不要去掉沉淀，一定要把所有的混合物上柱。
7. 将一半的溶液(如果有沉淀，则先混匀)转移到离心吸附柱中，13000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
8. 将剩下的一半溶液(如果有沉淀，则先混匀)转移到同一离心吸附柱中，13000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
9. 加0.7mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。再加0.3mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。一般样品如此洗涤两次即可，但如果在第7 步加入溶液B后有沉淀产生，则需要洗三次，每次加入的通用洗涤液的量分别为0.4、0.3和0.3mL。
10.室温离心半分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
11. 将离心吸附柱转移到RNase-free 收集管中，加入50-100μL RNA 洗脱液，室温放置1-2分钟。
12. 13000-15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
14. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
15. RNA 纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。

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