特别提示:包括SARS-CoV-2 RT-PCR试剂盒(Orf1ab-N片段,电泳法)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:SARS-CoV-2 RT-PCR试剂盒(Orf1ab-N片段,电泳法)
英文名称:SARS-CoV-2 Orf1ab-N RT-PCR Kit
产品货号:BTN13-81930y
产品规格:50次
本试剂盒根据PCR原理开发,用于体外定性检测人鼻咽拭子、痰液及肺泡灌洗液中的新型冠状病毒的Orf1ab-N片段,仅作为应对SARS-CoV-2感染的肺炎疫情期间的体外诊断应急使用。在使用上应遵守《中国CDC新冠肺炎实验室检测技术指南》、《新型冠状病毒感染的肺炎防控方案》等文件(现行版)的相关要求。可用于科研领域快速检测SARS-CoV-2。
试剂盒特点:
1.一站式,用户不需要单独准备每种成分,包括引物和对照。
2.根据2019新型冠状病毒的Orf1ab-N片段序列设计的引物,具有良好的特异性。
3.灵敏度可以达到1000拷贝/反应。
4.使用一管式RT-PCR技术,RT和PCR两步在一个试管内完成,不需要中间转移样品,降低了操作误差和可能的污染。
5.本产品足够50次20μL体系的RT-PCR。
6.本产品只能用于科研,不能用于临床。
试剂盒组成:
组分 |
规格 |
5×RT-PCR Buffer |
200μL |
MMLV-Taq Mix |
75μL |
超纯水 |
1mL |
SARS-CoV-2 Orf1ab-N片段
RT-PCR引物混合液 |
100μL |
SARS-CoV-2 Orf1ab-N片段
RT-PCR阳性对照(1×108拷贝/μL) |
50μL |
保存条件:-20℃保存,保存期限为一年。收到货后阳性对照需要跟其他成分分开放置,因为其容易污染其他成分,造成假阳性。
使用方法:
一、样品RNA的制备
1.用自选方法纯化样品RNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒RNA提取试剂盒兼容,可以选购本公司的柱式病毒RNA提取试剂盒(BTN71001)。
2.如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL SARS-CoV-2冠状病毒Orf1ab-N片段RT-PCR阳性对照的10000倍稀释液作为制备的阳性对照。可以用水作为制备的阴性对照。制备所得成为样品RNA。
二、设置RT-PCR反应(20μL体系)
3.如果有N+2个样品,则标记N+4个PCR管(额外增加的两个管一个是RT-PCR阳性对照,另一个是RT-PCR阴性对照)并按照下表在PCR管中加入下列成分:
成分 |
N+2个
样品管 |
RT-PCR
阴性对照 |
RT-PCR
阳性对照 |
5×RT-PCR Buffer |
各4μL |
4μL |
4μL |
SARS-CoV-2 Orf1ab-N片段
RT-PCR引物混合液 |
各2μL |
2μL |
2μL |
N+2个制备的RNA样品 |
各12.5μL |
- |
- |
超纯水 |
- |
12.5μL |
- |
SARS-CoV-2 Orf1ab-N片段
RT-PCR阳性对照10000倍稀释液 |
- |
- |
12.5μL |
MMLV-Taq Mix |
各1.5μL |
1.5μL |
1.5μL |
4.上机进行RT-PCR,RT-PCR反应参数为:
过程 |
温度 |
时间 |
逆转录 |
42℃ |
30min |
预变性 |
95℃ |
5min |
PCR反应(35个循环) |
95℃ |
30sec |
53℃ |
20sec |
72℃ |
20sec |
延伸 |
72℃ |
7min |
三、结果判定
5.琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物,则说明实验失败,需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、阳性对照有预期扩增产物的情况下,才有必要分析样品的实验结果,如果有预期片段大小的扩增产物则为阳性,如果无则为阴性。
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名称:小反刍兽疫病毒RT-PCR检测试剂盒
货号:BTN11-260
规格:50次
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产品特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒RNA模板。
2. 双酶一管式RT-PCR,操作简单快捷。
3. 提供阳性对照,便于在遇到问题时分析原因。
4. 引物经过优化,特异性高,引物是根据PPR病毒保守的N基因设计,产物长度为1416bp。
产品组成:
组分 |
编号 |
规格(50T) |
双酶一管式RT-PCR Buffer,2× |
BTN91202A |
750μl |
MMLV-Taq Mix |
BTN91202B |
100μl |
RNase-free水 |
BTN80403 |
1mL |
PPRV专一性引物一 |
YW315-1 |
100μl |
PPRV专一性引物二 |
YW316-1 |
100μl |
PPRV阳性对照 |
BTN100946 |
50μl |
保存条件:-20℃保存,有效期6个月。
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货号:BTN13-45800
规格:50次
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规格:50次
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