生物素标记UTP

特别提示：包括生物素标记UTP在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：生物素标记UTP
英文名称：Biotin-16-UTP
产品货号：A90001
产品规格：25μL

Biotin-16-UTP中的生物素通过酰胺键与尿苷三磷酸结合。生物素-16-UTP是SP6、T3和T7 RNA聚合酶的底物。它可以取代体外转录反应中的UTP，用于RNA标记。利用ATP、GTP、CTP、UTP和生物素-16-UTP和相应的RNA聚合酶分别对具有T7、SP6或T3启动子的线性模板DNA进行体外转录。随后，使用荧光链霉亲和素结合物或使用链霉亲和素-AP结合物通过ELISA检测标记RNA。

生物素标记的RNA可作为杂交探针，用于Northern印迹、Southern印迹、斑点或菌落转移、RNA酶保护实验、原位杂交及微阵列杂交。

分子式：biotin-16-UTP-Li₄
分子量：987.5
浓度：10mM
保存条件：-20℃

根据您的关注的生物素标记UTP，生物素-16-UTP，生物素-16-UTP四锂盐，您可能还对以下产品有需求：

 

货号	名称	规格
BTN90604A	PCR法DNA探针标记试剂盒	5次
YT030	生物素标记DNA试剂盒（TdT加尾法）	20次
YT948	细胞内钙离子荧光探针(Fluo-4 AM)	25微升
KFS157	线粒体绿色荧光探针(tracker Green)	50μg
KFS173	氯离子荧光探针 MEQ (6-甲氧-N-乙基喹啉碘)(CoFM FACS)	10mg
KFS174	锌离子荧光探针 TSQ (6-甲氧基-(8-p-甲苯磺酰胺)喹啉(HCS FACS)	1mg

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名称：TdT加尾法DNA生物素标记试剂盒
货号：BTN90605B
规格：5次
本试剂盒是基于TdT末端转移酶能够在DNA的3′端添加dNTP尾巴的原理而设计，该反应的示意图如下：


产品特点：
1.快速，15分钟即可完成标记反应。
2. 不但可用于单链DNA和DNA Oligo标记，还可用于3′突出的双链DNA标记，但后者标记效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高辛标记的核苷酸等)。
4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带地高辛标记核苷酸三种选择。
5. 同时提供非标记的dATP，用户可以用其调节加尾长短和标记核苷酸掺入比例。
6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。

试剂盒组成：
 

成分	规格
TdT缓冲液，5×	20μl
TdT(末端转移酶，10U/μL)	10μl
dATP，2mM	5μl
标记核苷酸	(A、B、C不同，见注)
超纯水	1ml
说明书	1份

注：A型用于自选标记，用户需自备标记核苷酸，本产品不提供标记核苷酸；B型提供5μl Biotin-11-dUTP；C型提供含5μl DIG-11-dUTP。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针，请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度)：
 

成份	用量
探针DNA	100-200 pmol
TdT Buffer，5×	4μl
标记核苷酸，1mM (A型需自备标记核苷酸)	1μl
dATP，2mM	(见下注)
TdT末端转移酶(10U/μL)	2μl
超纯水	补到20μl

注：dATP可以不加，但这样得到的加尾全部是标记核苷酸，由于空间阻碍，灵敏度不一定最佳。如果杂交效果不好，掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中，以控制标记的密度，提高比活。具体比例如何可以自己优化。
2. 37℃反应15分钟，延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在，一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长)；如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可，只是本试剂盒只提供dATP而已)，每条探针上可加上约100个核苷酸，平均含5个标记核苷酸
3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。
4. 如果需要，可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率，带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。
5. 如果是非同位素标记，探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针，请不要酚/氯fǎng抽提，因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。
6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA，加入前还需热变性)。如果不立即使用，非同位素标记的探针DNA可-20℃长期放置一年，同位素标记的探针DNA不能放置。

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