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核酸助沉剂
英文名称:Glycogen(20mg/mL)总访问:448
国产/进口:国产半年访问:6
产地/品牌:百奥莱博产品类别:分子生物学试剂
规       格:ALH061 最后更新:2025-2-13
货       号:ALH061
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销售商: 北京百奥莱博科技有限公司 查看该公司所有产品 >>
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特别提示:包括核酸助沉剂 在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:核酸助沉剂
英文名称:Glycogen(20mg/mL)
产品货号:ALH061
产品规格:0.7mL

本产品为分子生物学级Glycogen(糖原),不含DNase,不含RNase,可以用作沉淀DNA或RNA的辅助沉淀剂。作为DNA或RNA的辅助沉淀剂,大多数情况下glycogen比tRNA或超声处理过的DNA效果更好。由于glycogen中不含DNA和RNA,因此用glycogen作为辅助沉淀剂沉淀下来的核酸更适合于后续的PCR、RT-PCR以及内切酶等核酸酶反应。而tRNA或超声处理过的DNA作为辅助沉淀剂有时会干扰PCR、RT-PCR以及内切酶等核酸酶反应。据文献报道,连接反应产物用glycogen沉淀后对于后续的细菌转化没有干扰,0.001mg/ml glycogen不会抑制TdT,浓度不大于2mg/ml的glycogen不会影响反转录酶的活力,0.02mg/ml glycogen不会抑制T4 RNA ligase。Glycogen会干扰DNA和蛋白的相互作用。通常1微升Glycogen (20mg/ml)即可把少至皮克(pg)级的DNA或RNA从1毫升的溶液体系中沉淀出来。每个包装至少足够沉淀350个常规量的DNA或RNA样品。

操作步骤:
 
  • 在待沉淀的DNA或RNA样品中加入1微升Glycogen (20mg/ml),混匀。对于特定的实验操作,糖原的用量可以参考文献或特定的操作说明进行。
  • 根据实验需要采用乙醇或其它方法沉淀DNA或RNA。
  • 加入乙醇等沉淀试剂,混匀,12,000g左右离心10分钟,即可得到核酸和glycogen的共沉淀物。如果要求尽量沉淀完全,在加入乙醇等沉淀试剂并混匀后,可以-20℃或-80℃冻存数小时或过夜后再离心。


注意事项:
 
  • 通常每个样品加入1微升Glycogen(20mg/ml)即可,对于已知糖原可能对后续反应有干扰的情况,可以适当减少糖原用量,或使用本公司另外一款核酸助沉剂(货号:RN17)或者tRNA等作为辅助沉淀剂。
  • 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


根据您的关注的核酸助沉剂 ,分子生物级糖原溶液,分子生物学糖原溶液,核酸辅助沉淀剂,RNA助沉剂,DNA助沉剂,您可能还对以下产品有需求:


BTN90315 非冻型尿液DNA保存液 100mL
BTN100303 柱式真菌DNA提取试剂盒(玻璃珠法) 50次
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WE0167 高效无内毒素质粒大量提取试剂盒 2次|10次
ALH107 凝血DNA提取试剂盒 320次×50μl
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名称:非冻型血液DNA保存液
货号:BTN60910
规格:250mL
本品是在室温条件下长期保存用于DNA提取的血液样品的保存液,它通过裂解细胞并高效抑制DNase的活性而达到长期保证DNA分子的完整性。

产品特点:
1.保存时间长,可常温保存血液DNA长达六个月,尤其适合于野外血液样品采集。
2.DNA完整性好,纯化后长度在20-50 Kb之间。
3.DNA无化学修饰,提得的DNA可用于酶切、电泳、Southern杂交和PCR等分子生物学实验。
4.适用于各种动物血液(包括禽类血液)。
5.安全可靠,本产品无毒无害。
6.使用简单,直接把新鲜的血液样品与本产品混合即可。

储存条件:室温运输及保存,有效期两年。

使用方法:

一:哺乳动物血液(包括人血液)
1.将抗凝血(1-10mL)加入到适当容量的塑料离心管中。
2.加入等体积的血液DNAhold,充分振荡混合均匀。
3.常温闭光保存直到使用。
4.提取DNA时,可以取出部分液体,用自备的蛋白酶K(终浓度为0.1mg/mL)37℃处理过夜,然后再用经典的酚/氯fǎng抽提+乙醇沉淀方法得到DNA。

二:禽类血液
由于禽类血液有核细胞量远高于哺乳动物,血液的使用量很少,一般只有哺乳动物血液用量的1/100到1/1000,所以需先用等体积的水将血液DNAhold稀释,然后直接将禽类血液加入。其余操作同上。

名称:柱式石蜡包埋组织DNA提取试剂盒
货号:BTN130934
规格:30次

名称:凝胶法内毒素半定量试剂盒
货号:BTN130504
规格:10×0.1mL
本试剂盒又称鲎试剂,为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品。鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下(温度,pH值及无干扰物质),细菌内毒素激活C因子,引起一系列酶促反应,使鲎试剂产生凝集反应形成凝胶。

试剂盒组成:
 
成分 规格
鲎试剂,灵敏度0.06 EU/mL 0.1ml×10支
说明书 1份


储存条件:常温运输,阴凉处避光保存,有效期两年。

使用方法:

一、样品溶液的制备
样品的pH值应在6.0–8.0 之间,若超出此范围,需用无热原缓冲液或0.1N、0.1N 盐酸调节。若样品中可能存在鲎实验的干扰物质,见本说明书4.2“样品的干扰实验”。若样品中可能含有导致鲎试剂中G 因子旁路反应的(1,3)β-D-葡聚糖,需选用不会对(1,3)β-D-葡聚糖起反应的特异性鲎试剂。

二:细菌内毒素标准溶液及对照液的准备
2.1细菌内毒素标准溶液(本试剂盒不提供)
 取细菌内毒素工作标准品1支,按《细菌内毒素工作标准品使用说明书》配制2λ ,1λ ,0.5λ,及0.25λ的一系列内毒素标准溶液(λ为鲎试剂灵敏度标示值)。备用。
 注:鲎试剂灵敏度复核实验见本手册其他常用实验方案。
2.2 阴性对照液:即无内毒素水。
2.3 阳性对照液:即浓度为2λ的内毒素标准溶液。
2.4样品阳性对照液:即添加浓度为2λ内毒素标准的样品溶液。

三:内毒素检测
3.1 鲎试剂的溶解:按标示量(本试剂盒为0.1mL/支)加无内毒素水于鲎试剂中,轻轻振摇使鲎试剂完全溶解。注意不要引起气泡,溶解后的试剂应在10 min内使用(即配即用)。
3.2样品溶液的制备
 样品最大有效稀释倍数(MVD)的计算:
 MVD= C?L/λ
 λ:测试用鲎试剂灵敏度标示值(EU/mL);L:样品细菌内毒素限值;C:样品浓度或样品复溶后所得样品浓度。当L 单位为EU/mL(溶液)时,C的单位为1mL/mL;当L单位为EU/mg或者EU/U时,C的单位为mg/mL或者U/mL。按照计算所得体积,加无内毒素水制备样品溶液。
3.3 各反应管中分别加入0.1mL 阴性对照液,阳性对照液,样品,或样品阳性对照液。
 封闭管口,轻轻摇匀,垂直放入37℃的恒温器中温育60分钟±2分钟,温育期间避免振动。
3.4 结果判断
3.4.1 将试管从恒温器中轻轻取出,缓慢倒转180°。若管内的内容物呈坚实凝胶,不变形,不从管壁滑脱为阳性,记录为(+);不呈凝胶或虽生成凝胶但不能保持完整并从管壁滑脱为阴性,记录为(-)。
3.4.2 只有当阴性对照管结果均为阴性,阳性对照管、样品阳性对照管结果均为阳性,实验方有效,否则无效。若阴性对照管为阳性,提示鲎试剂、无内毒素水或实验器具可能受到污染。若阳性对照管为阴性,提示鲎试剂活性减失、内毒素标准溶液效价降低,鲎试剂的灵敏度或内毒素的效价标示不准确,或内毒素标准溶液的稀释不正确。若样品阳性对照管为阴性,提示反应体系内有干扰因素存在。

四:其他常用实验方案
4.1 鲎试剂灵敏度复核实验
 当使用新批号的鲎试剂或实验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时,应按《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“鲎试剂灵敏度复核实验”进行实验。按照下式复核灵敏度:λ=lg-1(ΣX/4),当0. 5λ≤λ ≤2.0λ时,鲎试剂灵敏度复核合格,检测时仍以标示灵敏度λ为准。
4.2样品的干扰实验
 当鲎试剂、样品的来源、配方、生产工艺或实验环境中发生了任何有可能影响实验结果的变化时,须按《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“干扰实验”进行干扰实验。以样品代替无内毒素水为溶剂,配制2λ,λ,0.5λ,及0.25λ的内毒素系列标准溶液进行灵敏度复核。若灵敏度复核值在0.5λ 到2λ之间(包含0.5 λ及2 λ),则认为在此实验条件下样品无干扰。若灵敏度复核值在0.5λ 到2λ之外,则认为在此实验条件下样品有干扰,需对样品进行稀释(稀释倍数不得超过最大有效稀释倍数MVD)或进行其它处理消除干扰。
4.3凝胶限度实验
 凝胶限度实验用于判断样品的内毒素含量是否超过药典所规定的细菌内毒素限值。按《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“凝胶限度实验”进行实验。在实验有效的情况下,如果样品管的两个平行管均为阴性,判定样品的内毒素含量小于药典规定限值。如果样品管的两个平行管均为阳性,判定样品的内毒素含量不符合药典规定。如果样品管的两个平行管一管为阳性,另一管为阴性,需进行复试。复试时,样品需做4个平行管,若所有平行管均为阴性,判定样品符合规定,否则判定样品不符合规定。
4.4凝胶半定量实验
 本方法系通过确定反应终点浓度来量化样品中内毒素含量。详见《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“凝胶半定量实验”。
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