特别提示:包括耐热LAMP Mix在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:耐热LAMP Mix
英文名称:Hot LAMP Mastermix
产品货号:MT2702
产品规格:20μl×100T
本制品专为DNA样本的LAMP扩增反应设计,用于浊度分析、浊度仪或搭配OTG橙绿变色反应管(货号:MT2100)。
本制品中的Bst DNA Polymerase HD为经重构架设计的Bst DNA聚合酶,其保留了Bst DNA聚合酶的链置换活性,并提高了其温度耐受性,该酶可以耐受85℃。这种短暂的高温耐热性能,使得该酶介导的LAMP反应具有以下几个优势:
- 在高温85℃加热2min后,可以将双链DNA进行变性,提高了引物的结合能力,从而提高LAMP检测的灵敏度;
- 在未经处理的检测样本中,可实现扩增反应同时裂解样本(从组织中释放DNA),从而实现核酸免提取的LAMP扩增;
- 在高温条件下打开引物的非特异性结构,明显降低LAMP反应的非特异性扩增;
- 短暂的高温可瞬时灭活病毒,降低检测样品的生物安全性。
LAMP是一种新型的滚环扩增技术,在恒温条件下,呈指数级别放大核酸分子,30分钟内将DNA放大10
9~10
10倍。其快速、恒温的独特技术优势,使得LAMP技术成为开发诊断试剂的明星潜力技术。由于在LAMP扩增中用到很高浓度的引物,因此难免保证有少量错配和引物Dimer,这些轻微的污染都会导致LAMP高速的扩增中造成假阳性检测。我公司依托出色的阴性控制技术建立了全新的LAMP检测平台。
产品组成:
组分 |
规格 |
Bst DNA Polymerase HD |
250μL |
2×Hot LAMP Buffer D |
1mL |
储存:长期保存于-20℃,保存2年。短期保存置于4℃,保存3个月,避免反复冻融。
2.5μl的Bst DNA Polymerase HD包含8U Bst DNA Polymerase HD、22%海藻糖。不含甘油,因此可用于建立LAMP引物mix与酶制品的冻干品,以提高LAMP检测制品的稳定性和易用性。
2×Hot LAMP Buffer D已包含dNTP、Mg2+和相应的反应缓冲盐。
使用方法:
- 配制反应体系
在0.2ml EP反应管中加入下述试剂
成分 |
用量 |
2×Hot LAMP Buffer D |
10μl |
Bst DNA Polymerase HD |
2.5μl |
10×LAMP Primer Mix |
2μl |
模板DNA(或粗样本) |
X μl |
ddH2O |
至20μl |
10×LAMP Primer Mix浓度:FIP/BIP分别为16μM、LoopF/B分别为4μM、F3/B3分别为2μM
- 反应程序
反应体系配好后,可先于85℃ 2min后,再置于60~72℃(首次实验采用65℃)进行反应20~45min。
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