单链DNA Ladder(25～75nt)

特别提示：包括单链DNA Ladder(25～75nt)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：单链DNA Ladder(25～75nt)
英文名称：single-strand DNA Ladder(25-75nt)
产品货号：RFT202
产品规格：50次

单链DNA Marker由不同长度的单链DNA分子混合而成，8条带的大小为20，25，30，35，40，50，50，75nt。样品保存在TE缓冲液中，35nt浓度为0.8μg/μL，其余条带浓度为0.4μg/μL。使用前与等体积2×TBE尿素上样缓冲液混合即可上样电泳。该Marker适用于跑尿素变性胶，电泳后使用单链DNA PAGE电泳染色试剂盒(Cat：RFT204)，核酸PAGE电泳染色试剂盒(Cat：RFT205)或核酸快速银染试剂盒(Cat：RFT206)染色均可以得到清晰的条带分离效果。产品内附带2×TBE尿素上样缓冲液(Cat：RFT207)。以每次上样5μL计算，混合好的单链DNA Marker可以使用大约50次。

产品组成：
 

名称	规格	保存条件
单链DNA Marker(25-75nt)	125μL	-20℃
2×TBE尿素上样缓冲液	1mL	4℃或-20℃

保存条件：-20℃贮存，有效期24个月；湿冰运输。

使用方法：
以下使用方法均以8×10cm凝胶厚1.0mm示例，其他规格凝胶请适当调整。

一、凝胶制备：
可以选择DNA尿素PAGE电泳试剂盒(Cat：RFT203)或按照以下程序制胶。
表一：配制不同浓度凝胶所需各组分的体积(mL)(8×10cm 1.0mm厚度)
 

单链DNA长度	最佳凝胶浓度	尿素(g)	40%PAA(29:1)	5×TBE	补水到	10%APS	TEMED
200-1000nt	5%	2.94	0.875mL	1.4mL	7mL	70μL	7μL
50-400nt	8%	2.94	1.4mL	1.4mL	7mL	70μL	7μL
30-300nt	10%	2.94	1.75mL	1.4mL	7mL	70μL	7μL
10-150nt	15%	2.94	2.625mL	1.4mL	7mL	70μL	7μL

加入10%APS和TEMD后，立即混匀，凝胶常温(25℃)静置30-40分钟。
【注】：
● 凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时，聚合较快；冬天气温低时，聚合时间会延长。可以根据环境温度的不同调节APS的加入量。

二、样品制备：
取适量体积单链DNA Marker样品与等体积的2×TBE尿素上样缓冲液(Cat：RFT207)混合，70℃处理5分钟，冰浴制冷后待上样。待测样品也需要进行同样处理。

三、电泳：
 

• 预电泳：电泳槽内外加入适量1×TBE缓冲液稳压200V预电泳30分钟。电泳结束后，用1×TBE缓冲液彻底冲洗加样孔2-3次，去除残余的尿素。
• 上样：根据梳齿确定Marker上样量，一般是10齿1mm厚梳子上样5μL,15齿1mm厚梳子上样3μL。
• 连接电源线，打开电源开关，按照以下条件电泳。
   

  	恒电压	起始电流	结束电流	电泳时间	适用条件
  推荐电压	200V	15-20mA/板胶	10-15mA/板胶	60+ min	最佳电压，最优的分辨率

• 等待上样缓冲液的溴酚蓝指示前沿到凝胶底部时终止电泳，取出凝胶进行后续实验。
   

  变性胶浓度	溴酚蓝	二甲苯菁
  5%	35nt	130nt
  8%	19nt	75nt
  10%	15nt	55nt
  15%	10nt	52nt

四、染色：
用单链DNA PAGE电泳染色试剂盒(Cat：RFT204)，核酸PAGE电泳染色试剂盒(Cat：RFT205)或核酸快速银染试剂盒(Cat：RFT206)染色均可以得到清晰的条带分离效果。

注意事项：
 

• 单链DNA Marker产品适用于变性PAGE垂直电泳，不适用于非变性PAGE电泳或水平琼脂糖凝胶电泳。
• 强烈建议使用用单链DNA PAGE电泳染色试剂盒(Cat：RFT204)以便获得最佳效果的胶图。其余染料如GelRed，Goldview，EB等染色效果不好。

电泳示例：



根据您的关注的单链DNA Ladder(25～75nt)，单链DNA Ladder，单链DNA Marker，ssDNA Ladder，ssDNA marker，您可能还对以下产品有需求：



名称：DNA marker(φX174 DNA/Hinc II)
货号：BTN90602I
规格：50次
 本系列产品为传统的酶切分子量标准，由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后，加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知，每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。
 每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5uL。

使用效果：


疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。

名称：PCR产物DNA纯化试剂盒
货号：YT009
规格：50次
本试剂盒是一种用于PCR产物纯化或从多种DNA反应体系中纯化DNA的试剂盒。适用于PCR反应后去除引物、酶、矿物油、甘油、盐等杂质；也同样适用于酶切、连接、磷酸化、补平或切平、随机引物等反应后的DNA纯化。纯化所得DNA可直接用于酶切、连接、转化细菌、测序、PCR、杂交等后续操作。本试剂盒适用于纯化100bp-10kb DNA，长至30个碱基的引物均可被完全去除。

本试剂盒采用了一种新型的DNA纯化柱，足够纯化50个平均体积不超过400微升的DNA样品。在特定条件下，使DNA能在离心过柱的瞬间，结合到DNA纯化柱上，在一定条件下又能将DNA充分洗脱，从而实现DNA的快速纯化。无需酚氯fǎng抽提，无需酒精沉淀，12个样品只需不足15分钟即可完成。 每个DNA纯化柱可以结合的DNA量的上限约为15微克。DNA回收效率约为90%。接近100bp或10kb的DNA片段回收效率要略低一些，大于10kb的DNA回收效率迅速下降。另外如果样品中DNA含量特别低也会导致回收效率下降。本试剂盒的纯化效果参见下图。


本试剂盒纯化效果图。本图仅作参考，不同的样品不同的纯化条件，实际的纯化效果可能和上图有一定的差别。

产品组份：
溶液I (DNA纯化结合液)————20ml
溶液II (洗涤液)——————26ml(第一次使用前加入39ml无水乙醇)
溶液III (洗脱液)——————3ml
DNA纯化柱及废液收集管————50套

注意事项：
1.第一次使用前在溶液II(洗涤液)中加入39ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
2.溶液I对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护。
3.本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
4.废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。
5.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：室温，有效期一年。

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货号	名称	规格
BTN100205	一站式DNA非变性PAGE电泳套装	30次
BTN51210	超快核酸电泳液(干粉)	50L
BTN120654F	Southern DNA Marker Oligo(DIG标记)	20次
YT016	绿色核酸染料(RNA染料)(DNA染料)	1ml|5ml
RFT005	200bp DNA ladder(200～3000bp)	100T(2×250μl)
RFT022	DNA Marker V(200～2000bp)	100T(2×250μl)

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