Taq DNA Polymerase(PAGE胶专用)

特别提示：包括Taq DNA Polymerase(PAGE胶专用)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Taq DNA Polymerase(PAGE胶专用)
英文名称：Taq DNA Polymerase(for PAGE)
产品货号：WE0414
产品规格：2500U

Taq DNA Polymerase是通过大肠杆菌表达纯化的重组酶。其基因来源于Thermus aquaticus polymerase。该蛋白分子量为94kDa，具有5′→3′ DNA聚合酶活性和5′→3′外切酶活性，无3′→5′外切酶活性，扩增得到的PCR产物3′端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高的特点，主要适用于PCR法扩增DNA片段、DNA序列测定等实验，PCR扩增产物专用于聚凝胶电泳检测。

产品组成：
 

组份	2500U
Taq DNA Polymerase(5U/μL)	5×100μL
10×PCR Buffer Ⅱ	5×1.8ml

【注】：
● 本产品的10×PCR Buffer Ⅱ中含有15mM镁离子。

保存条件：-20℃

活性定义：
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位（U）。

质量控制：
1、经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；
2、经检测无外源核酸酶活性；
3、PCR方法检测无宿主残余DNA；
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；
5、室温存放一个月，无明显活性改变。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系：
 

试剂	50μL反应体系	终浓度
10×PCR Buffer Ⅱ	5μL	1×
dNTP Mix，10mM each	1μL	200μM each
Forward Primer，10μM	2μL	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μL	0.4μM
Template DNA	＜0.5μg	＜0.5μg/50μL
Taq DNA Polymerase	0.25-0.5μL	1.25-2.5U/50μL
ddH2O	up to 50μL

【注】：
● 引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2、PCR反应条件:
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2min
变性	94℃	30s	25-35个循环
退火	55-65℃	30s
延伸	72℃	30s
终延伸	72℃	2min

【注】：
● 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
● 延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
● 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

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名称：BtsCI限制性内切酶
货号：SV0282
规格：10KU|2KU
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件
CutSmart 缓冲液，50℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度
20,000units/ml。
37℃ 时活性
50%。
甲基化敏感性
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项
BtsCl是BstF5l的完全同裂酶，是 Fokl的不完全同裂酶。

名称：CviKI-1限制性内切酶
货号：SV0296
规格：1250U|250U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
浓度:
5,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
过夜酶切或添加 20%的 DMSO 会明显增强 CviKl-1的星号活性，在这样的条件下，DNA
将被切成小的寡聚体。
如下条件可能出现星号活性:延时酶切、高酶浓度或甘油浓度＞5%。

名称：LongAmp 热启动 Taq DNA 聚合酶
货号：SV0913
规格：2500U|500U
概述:
LongAmp Taq DNA聚合酶是 Taq和Deep VentR™ DNA聚合酶的优化混合，相比单用 Taq DNA聚合酶，它能以更高的保真度扩增出更长的 PCR 产物。
LongAmp 热启动 Taq DNA聚合酶:
LongAmp 热启动 Taq DNA聚合酶利用了一种特定合成的核酸适配体，它能够与酶可逆结合，当温度低于45℃ 时抑制聚合酶活性，正常的热循环条件下释放聚合酶。
其它剂型:
为了加样方便，LongAmp Taq 与 LongAmp 热启动 Taq DNA聚合酶均有预混液剂型可供选择。LongAmp Taq PCR试剂盒包含 LongAmp Taq DNA聚合酶(2,500units/ml)、dNTP 混合液(10mM)、LongAmp Taq 反应缓冲液套装(5X)、LongAmp Taq的反应缓冲液套装(不含镁离子)、MgSO4(100mM)和无核酸酶污染的水。
浓度:
2,500units/ml。

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货号	名称	规格
YT404	DNA末端平滑试剂盒	20次
WE0213	DNase I(不含RNase)	1000U
SV0149	Bpu10I限制性内切酶	1KU|200U
SV0151	BpuEI限制性内切酶	2500U|500U
SV0170	BsaXI限制性内切酶	500U|100U
SV0332	EciI限制性内切酶	500U|100U
SV0581	PaeR7I限制性内切酶	10KU|2KU|1KU

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