耐热SYBR LAMP Mix

特别提示：包括耐热SYBR LAMP Mix在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：耐热SYBR LAMP Mix
英文名称：Hot SYBR Green LAMP Mastermix
产品货号：MT2703
产品规格：20μL×100T

本制品专为DNA样本的LAMP扩增反应设计，扩增结果肉眼可见，扩增完毕后阳性样品为黄色，阴性样品为红色。

本制品中的Bst DNA Polymerase HD为经重构架设计的Bst DNA聚合酶，其保留了Bst DNA聚合酶的链置换活性，并提高了其温度耐受性，该酶可以耐受85℃。这种短暂的高温耐热性能，使得该酶介导的LAMP反应具有以下几个优势：
 

• 在高温85℃加热2min后，可以将双链DNA进行变性，提高了引物的结合能力，从而提高LAMP检测的灵敏度；


• 在未经处理的检测样本中，可实现扩增反应同时裂解样本（从组织中释放DNA），从而实现核酸免提取的LAMP扩增；


• 在高温条件下打开引物的非特异性结构，明显降低LAMP反应的非特异性扩增；


• 短暂的高温可瞬时灭活病毒，降低检测样品的生物安全性。

LAMP是一种新型的滚环扩增技术，在恒温条件下，呈指数级别放大核酸分子，30分钟内将DNA放大10⁹～10¹⁰倍。其快速、恒温的独特技术优势，使得LAMP技术成为开发诊断试剂的明星潜力技术。由于在LAMP扩增中用到很高浓度的引物，因此难免保证有少量错配和引物Dimer，这些轻微的污染都会导致LAMP高速的扩增中造成假阳性检测。我公司依托出色的阴性控制技术建立了全新的LAMP检测平台。

产品组成：
 

组分	规格
Bst DNA Polymerase HD	250μL
2×Hot SYBR LAMP Buffer D	1mL

储存：长期保存于-20℃，保存2年。短期保存置于4℃，保存3个月，避免反复冻融。

2.5μl的Bst DNA Polymerase HD包含8U Bst DNA Polymerase HD、22%海藻糖。不含甘油，因此可用于建立LAMP引物mix与酶制品的冻干品，以提高LAMP检测制品的稳定性和易用性。
2×Hot SYBR LAMP Buffer D已包含dNTP、Mg2+和相应的反应缓冲盐。

使用方法：
 

• 配制反应体系
  在0.2ml EP反应管中加入下述试剂
   

  成分	用量
  2×Hot SYBR LAMP Buffer D	10μl
  Bst DNA Polymerase HD	2.5μl
  10×LAMP Primer Mix	2μl
  模板DNA(或粗样本)	X μl
  ddH2O	至20μl

  
  10×LAMP Primer Mix浓度：FIP/BIP分别为16μM、LoopF/B分别为4μM、F3/B3分别为2μM


 
• 反应程序
  反应体系配好后，可先于85℃ 2min后，再置于60~72℃（首次实验采用65℃）进行反应20~45min。

根据您的关注的耐热SYBR LAMP Mix，耐热LAMP预混反应液，您可能还对以下产品有需求：



名称：PCR级甲酰胺
货号：BTN100839
规格：250mg
本产品为PCR级的甲酰胺，其可以促进某些引物、模板退火，降低带有二级结构的DNA的变性温度，是一种常用的PCR增强剂。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

名称：一管式反转录试剂盒
货号：BTN170403
规格：10次
本产品是一管式反转录预混Mix，内含反转录第一链合成所需的所有试剂(MMLV、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer等)，用户只需加入模板RNA和RNase-Free水即可进行反应。

产品特点：
1.cDNA的合成更加方便，用户只需准备模板和水即可进行反应。
2.快捷，操作步骤已经最大限度地简化，能减少污染，降低实验误差。
3.效率高，特殊优化的oligo dT和N6随机引物配比，反转录效率高。
4.速度快，只需42℃，20分钟即可完成cDNA第一链的合成。
5.能够用于GC含量高，二级结构复杂的RNA模板，合成cDNA片段长度可达12kb。
6.兼容性好，合成的cDNA可直接用于荧光定量PCR反应，灵敏度高、稳定性好。

试剂盒组成：
 

成分	规格
2×RT MasterMix	0.1ml
RNase-Free水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.解冻后颠倒轻弹混匀各组分，以20μL体系为例，按下表加入(2×RT Master Mix很粘稠，取用前请短暂离心，并避免吸头外壁沾附损失)：
 

2×RT MasterMix	10μl
Total RNA/mRNA模板(自备)	50ng-2μg/5-200ng
补RNase-Free水到	20μl

 注意：对于二级结构很复杂的RNA模板，推荐使用变性步骤，即在操作步骤之前，将模板RNA在65℃孵育5分钟后迅速转移到冰上，再进行下一步操作。
2.轻轻混匀，42℃孵育20分钟进行反转录反应。
 注意：对亍二级结构复杂或者GC含量高的模板，可以提高温度至50℃，以增强反转录效率。
3.85℃加热5秒钟灭活反转录酶置冰上备用(更长时间保存请置于-20℃)。

注意事项：
1.实验过程中请注意避免RNase污染，防止RNA降解或实验中的交叉污染。
2.使用之前请完全溶解并充分混匀，以防因盐离子浓度丌均影响实验结果。
3.使用后应尽快放回-20℃，避免反复冻融。
4.RNA模板的完整性对cDNA合成效率起着决定性作用，因此请选择可靠的RNA提取/纯化方法。
5.如果扩增片段较长或者RNA结构复杂，为了加强转录效果，可以将RNA单独置于65-70℃加热5-10分钟后再加入体系。
6.操作人员请带口罩和一次性手套，并经常更换手套。

关注耐热SYBR LAMP Mix，耐热LAMP预混反应液的同时，为您推荐更多您可能感兴趣的产品：

 

货号	名称	规格
BTN131212	PCR Mix染料	10mL
BTN130308	一管式双链cDNA合成试剂盒	10次
BTN130957	免RNA提取RT-PCR试剂盒(细胞组织裂解物RT-PCR试剂盒)	100次
BTN130833	LAMP可见光染料	1mL
BTN131083	Ribo-SPIA cDNA扩增试剂盒	20次
YT378	2×PCR Master Mix（含Taq酶，buffer，dNTP）	400次

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